吗啉丙磺酸MOPS,CAS是1132-61-2,是生物化学和分子生物学中常用的一种两性离子缓冲液,结构类似于 2-(N-啉)乙磺酸(MES),同样属于1966年由Dr.Norn Good及其同事归类的“Good”缓冲液之一。
MOPS 的有效 pH 缓冲范围为 6.5-7.9,pKa=7.2(25℃),其 pKa 比 MES(pKa=6.1)更接近生理 pH7.4,因此更适合用做生理相关的缓冲液,如用于哺乳动物细胞的培养(建议使用浓度应≤20 mM)、RNA 变性琼脂糖凝胶电泳实验(以 20 mM 的浓度使用于甲醛凝胶效果较好)、不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳实验等。以下为MOPS缓冲液配置方面的相关知识。
1、10x配制的原料
83.7克MOPS;分子量209.3 g / mol
13.6克醋酸钠,三水合物; MW 136.1 g / mol(注意:无水NaAc仅82 g / mol或8.2g)
3.7克EDTA,二水合二钠; MW 372.24 g / mol(再次检查所储存盐的MW)
2、的配置步骤
加入800毫升无核酸酶的蒸馏水;混合溶解;
用NaOH调节至pH 7(在无核酸酶的蒸馏水中制备);
加去离子水至1000毫升的最终体积。
3、缓冲液的注意事项
MOPS 缓冲液可于2~8℃保存至少 6 个月,用0.2 μm滤膜过滤除菌,不推荐高压灭菌。如需配制无核酸酶的MOPS 溶液,可先对水进行高压灭菌后,再加入粉末溶解。需避光室温保存,如果溶液较暗(黄色就可以),请勿使用。MOPS会干扰Folin蛋白,含葡萄糖的MOPS溶液经高压灭菌会导致其部分失活。
4、的稳定性
与通常的看法相反,MOPS缓冲液具有足够的热稳定性,可以进行高压灭菌。溶液将变为黄色,但这不会影响其缓冲能力。例如:Farrell RNA方法,稻草色的缓冲液很好,但不要使用较深的缓冲液。
5、的应用领域
RNA琼脂糖凝胶
NuPAGE电泳
bis-Tris SDS-PAGE
6、MOPS的存储方法:MOPS粉末可于室温保存数年。不过一经静置,散装粉末可能聚集在一起,形成硬块,但是不会影响其化学性质。
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