Tris盐酸即三羟甲基甲胺-盐酸盐Tris-HCl缓冲液,适用于大多数蛋白质、核酸相关的研究实验,通常用它作为缓冲液应用在蛋白质SDS-PAGE电泳实验中,电泳分辨率高。
由Tris组成的生物缓冲液,常配成pH值为6.8,7.4,8.0,8.8。其pH值随温度变化相对较大。一般来说,温度每升高一度,PH值下降0.03。1M Tris-HCl 6.8和1.5M Tris-HCl 8.8是最常用的试剂。Tris可溶解核酸和蛋白质。
SDS-PAGE是相当普遍的聚丙烯酰胺凝胶电泳,是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的电泳技术,适合以及的分离。聚丙烯酰胺凝胶呈微观网状结构,具有分子筛效应,分为(Native-PAGE)和-聚丙烯酰胺凝胶(SDS-PAGE)两种形式。
在蛋白质SDS-PAGE不连续电泳实验中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH值6.7,pH为8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩电泳凝胶中,其pH值呈弱酸性,因此甘氨酸只有很少量的会解离,其在的作用下,泳动效率低;而氯离子却很高,两者之间形成较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与成反比,这一区带便形成了较高的电压梯度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩为一狭窄的区带。
当样品进入分离胶后,由于胶中pH的增加,呈碱性,甘氨酸大量解离,泳动速率增加,直接紧随氯离子之后,同时由于分离胶的缩小,在的作用下,蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。
所以,pH对整个反应体系的影响是至关重要的,实验中在排除其他因素之后仍不能很好解决问题的情况,应首要考虑该因素,当然其他的因素也可以从多方面考虑。
Tris盐酸由Tris与盐酸混合制得,像氨基丁三醇、缓血酸胺、2-氨基-2-(羟甲基)-1,3-丙二醇等都是指的Tris,是德晟生产的重要原料,还可以用于其它各种缓冲液体系。