缓冲溶液是包含弱酸及其共轭碱的水基溶液,由于缓冲液的化学性质,即使物质发生化学变化,缓冲液也可以将它的PH值(酸度)保持在几乎恒定的水平。缓冲液自然存在于血浆中,它保持血液PH值处于7.35-7.45之间。在有机系统中,天然缓冲液将PH值保持在一致的水平。但是在生物研究的过程中,必须通过缓冲液来保持PH值的不变。缓冲液种类繁多,Tris缓冲液是常用的生物缓冲液之一。
什么是 Tris 缓冲液?
Tris 是三(羟甲基)氨基甲烷的缩写,这是一种常用于盐水中的化合物,因为它是等渗且无毒的, pKa 为 8.1,pH 值介于 7 和 9 之间,因此 Tris 缓冲溶液也常用于一系列化学和生物研究中,包括 提取。重要的是要知道 tris 缓冲溶液中的 pH 值会随溶液温度而变化。
如何制备 Tris 缓冲液
制备Tris缓冲液非常简单,只准备以下材料
三(羟甲基)氨基甲烷(TRIS)
蒸馏去离子水
盐酸
步骤
1、首先确定您想要的 Tris 缓冲液的浓度()和体积。例如,用于生理盐水的 Tris 缓冲溶液从 10 到 100 mM 不等。根据实验需求,通过将缓冲液的摩尔浓度乘以正在的缓冲液的体积来计算所需的 Tris 的摩尔数。(Tris 的摩尔数 = mol/L x L)
2、接下来,通过将摩尔数乘以 Tris 的分子量 (121.14 g/mol) 来确定这是多少克 Tris 的克数 = (摩尔) x (121.14 g/mol)
3、将 Tris 溶解到蒸馏去离子水中,达到所需最终体积的 1/3 到 1/2。
4、混入 HCl(例如 1M HCl),直到为您的 Tris 缓冲溶液提供所需的 pH。
5、用水稀释缓冲液以达到所需的最终溶液量。