赛默飞离子色谱法测定帕米膦酸二钠注射液的含量

帕米膦酸二钠注射液（Pamidronate Disodium Injection）为帕米膦酸二钠 加适量甘露醇制成的灭菌水溶液。帕米膦酸二钠是一种双膦酸类骨吸收抑制 剂，临床上广泛应用于治疗骨质疏松症、肿瘤并发的高钙血症和变形性骨炎 [1] 。目前液相色谱法测定帕米膦酸二钠及其制剂的方法主要有荧光检测高 效液相色谱法[2, 3] 、蒸发光散射液相色谱法[4] 和示差折光检测液相色 谱法[5] 。由于荧光检测需要柱前衍生，步骤繁琐；蒸发光检测需要用到离子对 试剂，对实验条件要求较高，重现性较差；示差折光检测的灵敏度较低等原 因，故本文采用离子色谱法建立了帕米膦酸二钠注射液的含量检测方法。

帕米膦酸含有一个氨基和两个膦酸基团，为双性离子，通过一定PH 抑制其中一方向电离，可以通过离子色谱进行分离。而中性情况下其带负 电荷较多，可以通过电导检测器进行检测。如果使用阴离子交换离子色谱 分离，由于双膦酸基团价态较高，疏水性较强，所以适宜使用疏水性弱的 柱子来进行分离。曾实验过疏水性极弱的Dionex IonPac AS16，疏水性低 的Dionex IonPac AS19，及疏水性中低的Dionex IonPac AS11－HC进行实 验，用OH梯度进行淋洗，但均出现峰分叉明显，峰扩展宽等情况，可能受 其氨基的影响。而使用碳酸盐作为淋洗液的分离柱，如亲水性强的Dionex IonPac AS22，则由于保留太强无法出峰。如使用酸作为淋洗液，则可抑制 其电离，使其保持较低的价态，从而加快出峰。但由于酸只能用非抑制型电 导检测，因此使用非完全电离的有机酸比完全电离的无机酸有助于降低背景 值。且多价态的酸其电离类似于膦酸，更有利于洗脱，故选用草酸，邻苯二 甲酸等进行试验。邻苯二甲酸pKa1=2.95 pKa2=5.41，草酸的PKa1=1.23, Pka2=4.19，因此相同摩尔浓度的淋洗液，草酸由于电离更强，抑制双膦酸 电离效果更明显，帕米膦酸出峰更早。且在草酸淋洗液中，帕米膦酸响应更 强，相同浓度的峰高为其在邻苯二甲酸淋洗体系中的20倍。因此使用草酸进 行后续实验。

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