ELISA试剂盒如何做好标准曲线

来源:网络  作者:网络转载   2019-10-10 阅读:166

 若要给美好人生一个定义,那就是惬意。若要给惬意一个定义,那就是三五知己、谈笑风生。若要给上海雅吉生物公司一个定义,那就是科研朋友们的买ELISA试剂盒的不二选择。

  周老师是苏州大学在校研究生,老师在我司买了相应的抗体自己包被ELISA试剂盒。也是刚刚接触ELISA实验的新手,研究大鼠白介素相关指标的实验,做完大鼠白介素5ELISA实验后反应标准曲线的梯度都不好。刚加完显色剂的时候梯度还算明显,但是显色比较浅,随着时间延长(大概6、7分钟)以后梯度就不明显了。终止反应后测得的值梯度就没有了。特咨询我司技术帮忙分析原因所在。我司技术分析:

1、刚加完显色剂时梯度明显:显色液可能是从高浓度向低浓度孔加的。
2、酶浓度太高,导致后显色结果都是高的
3、包被-酶标系统不匹配或者酶标的非特异反应太强,或者酶标仪读数范围不够,
4、样本中有能够催化底物的物质,没洗下来。
5、建议:包被、酶标重新做梯度,先用较低的浓度把梯度摸索好,然后再优化灵敏度,后调出所需的灵敏度、线性范围

6、有条件的话,可以把酶免的蛋白系统移植到板式化学发光上,加完底物三分钟读数。

7、蛋白系统灵敏度够的话,显色十分钟就差不多了。
8、酶是自己标的这种情况的,HRP比例不要太高。
  上海雅吉生物一直秉着以质量求生存,以信誉求发展的精神,精益求精,力求做到更好。全体员工孜孜不倦为国内科研事业单位以及高校等提供的产品服务!本公司ELISA试剂盒具有质量可靠,灵敏度好,更具有免费代测及技术指导服务,欢迎科研者来电详询!

标签: 曲线
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