HPLC故障排除指南-峰值
峰形问题
|
|
峰拖尾 | |
与活性硅醇的相互作用 | 1. 使用超高纯度硅基(硅胶基质)固定相 (见1.1) 2. 添加碱性流动相添加剂(如TEA)- 超高纯度相则不需要 |
在固定相中与金属离子螯合 | 同上 |
错误的流动相pH值(流动相pH值不当) | 1. 降低流动相pH值以抑制硅烷醇电离(见1.2) 2. 增加缓冲液浓度(见1.2) |
玻璃料阻塞(筛板堵塞) | 1. 倒冲洗柱(反冲色谱柱)(见5.2) 2. 使用串联(在线)过滤器(见1.3、4.2) |
柱无效(色谱柱失效) | 1. 倒冲洗柱(反冲色谱柱)(见5.2) 2. 更换柱 (色谱柱) |
死体积未清扫(过大) | 1. 尽量减少连接器数量 2. 使用较短的连接管 3. 检查所有配件是否紧固 |
分裂峰 | |
保护柱或分析柱入口(进样)端污染 | 1. 拆下保护柱卡套(卸除保护柱芯)并进行分析 - 必要时更换保护柱 2. 倒冲洗(反冲)分析柱(见5.2) 3. 对于顽固残留(强保留污染物),应尝试再生法(对色谱柱进行再生)(见5.2) 4. 更换柱 |
玻璃料阻塞 (筛板堵塞) | 1. 倒冲洗柱(反冲色谱柱)(见5.2) 2. 使用串联(在线)过滤器(见1.3、4.2) |
样品溶剂与流动相不兼容 | 1. 在流动相中注入样品 (用流动相溶解样品) |
同时洗脱第二组分 | 1. 注射前使用样品清理 (进样前先净化样品) 2. 通过改变流动相或柱相(色谱柱固定相) 来改变选择性 |
柱超载(色谱柱过载) | 1. 使用更高容量的固定相 2. 增加柱的直径 (增加色谱柱内径) 3. 减少样本(样品)量 |
柱中通道的形成 (色谱柱内形成通道) | 1. 更换柱 (色谱柱) 2. 在建议的色谱柱(色谱柱建议的)pH值范围内操作(见1.5) |
柱超载 (色谱柱过载) | 1. 注入更少量或更稀释的样品溶液 (减少进样体积或进一步稀释样品) 2. 使用更高容量的固定相 |
样品溶剂与流动相不兼容 | 1. 在流动相中注入样品(用流动相溶解样品进样) |
低温 | 1. 增加柱的温度 (升高柱温) |