左旋肉碱(L-Carnitine, β-羟基γ-三jia铵丁酸)又称肉毒碱或维生素 BT,其化学式为C7H15O3N,分子量为162.2,是一种类氨基酸。L-肉碱作为 载体将长链脂肪酸从腺粒体膜外输送到膜内,促进脂肪酸的β-氧化,从降低 血清胆固醇及甘油三脂的含量,提高机体耐受力及减少代谢毒性作用[i-iv] 。对 婴幼儿来说,L-肉碱在维持婴幼儿生命及许多促进发育的生理过程,如生酮 作用、蛋白质代谢等方面均有一定的功能[v,vi] 。我国及许多其它国家已规定在 婴幼儿食品配方中添加适量的L-肉碱,以满足其生理需要,更好地促进婴幼 儿健康成长[vii-x] 。
左旋肉碱极性较强,缺少发色基团,定量分析困难。国内外对左旋肉碱 的测定主要有酶法[xi,xii] 、电泳[xiii,xiv] 、流动相注射串联质谱法[xv] ,液相色谱 法[xvi-xix] 等。酶法专属性强,但前处理繁琐,液相色谱法中低波长检测则 干扰较多,衍生法灵敏度高,但前处理复杂,所用衍生剂毒性强。其它方法 有的灵敏度较低。有的设备较贵等原因较少使用。
离子色谱法可测定在水溶液中能电离的物质。在酸性溶液中,左旋肉碱 表现为阳离子特性,带正电荷,可用阳离子交换色谱柱分离。但左旋肉碱的 两性特征使其在抑制后呈电中性,无法采用抑制型电导检测。同时,奶粉中 左旋肉碱添加量较低,需要更低检出限的测定方法。为此,我们通过实验, 摸索出左旋肉碱的在线固相萃取非抑制型离子色谱测定的新方法。该方法前 处理简便、检测快速,用于奶粉样品中左旋肉碱的检测,结果令人满意。
测试条件 仪器:ICS系列离子色谱系统带双六通阀及双泵。 分析柱: IonPac CS17+IonPac CG17,4mm 浓缩柱: IonPac TCC-UPL1 MSA:0-20min,3mM;流速:1mL/min 柱温:30℃ 检测方式:抑制型电导检测 进样量:500µL
样品前处理 称取奶粉样品约1 g至50 mL比色皿中,加入超纯水 14 mL,适当摇晃,使奶粉充分溶解后加入21 mL乙腈 沉淀蛋白,静置10 min,取上层清液,10000 r/min离心 10min后,稀释5倍,将稀释液依次通过0.22µm尼龙滤膜 和onGuard II RP柱、Na柱,弃去6mL初始流出液后采集 2mL样品用于离子色谱测定。 onGuard II RP柱(规格2.5cc),预先使用10mL甲 醇和15mL水活化。 onGuard II Na柱,用10mL水活化。
详细了解请点击:戴安ICS-600基础型离子色谱仪