酸性红1 是一种工业染料，它有4个别名：偶氮荧光桃红、偶氮焰红，酸性红G，食品红10。
它的长相是这样的：
哇！！一看就不是什么能吃的东西啊！
然而，就是有一些不法商贩会在食品中添加酸性红1，目前我国尚无相关的检测标准。月旭科技亲自采购了酸性红1标准品，从各大超市采购红酒、红枣、火腿肠、酸奶作为实际样品，开发出食品中酸性红1检测的方法。该方法快速，灵敏度高，重现性好。
适用范围
适用于红酒、红枣、火腿肠、酸奶等基质中酸性红1的检测。
参考标准：《GB 5009.35-2016 食品安全国家标准食品中合成着色剂的测定》
目前酸性红1还没有具体的标准，我们根据GB 5009.35-2016的方法，优化了提取步骤，使样品在过PA小柱后，回收率高，净化效果好，方法稳定性好。
相关试液的配置
1）准确称取酸性红1标准品50mg，用10%甲醇水溶液溶解并定容到50mL，得到1000μg/mL标准储备液。
2）准确移取酸性红1标准储备液 1000μg/mL 5mL，用10%甲醇水溶液稀释并定容到50mL，得到10μg/mL标准使用液。
3）提取液A配置：取100mL乙醇，50mL乙腈互溶；然后取其中140mL乙醇：乙腈（2：1）混合液，加入60mL水和2mL的氨水。
4）柠檬酸溶液：称取 20g 柠檬酸（C6H8O7·H2O），加水至 100mL，溶解混匀。
5）pH=6 的水：500ml的水加柠檬酸溶液调节至 pH 到 6，如果水pH偏低于6可以直接使用。
6）pH=4的水:500ml的水加柠檬酸溶液调节至 pH 到 4。
7）甲醇：甲酸（6：4）：取甲醇150mL+甲酸100mL。
8）洗脱剂：先取2mL的氨水定容至100mL成为2%的氨水溶液；再用20mL的2%氨水溶液加70mL乙醇加10mL水。
9）10%甲醇：10mL甲醇加90mL水。
乙酸铵溶液（0.02mol/L）：称取1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，经0.45μm滤膜过滤。
提取步骤
一、红酒
取1mL样品加入0.3mL甲酸，振荡，待净化。
二、红枣
（1）将1.000g样品置于50mL 离心管，加入20mL提取液A，振荡2min，60℃水浴超声10min，6000rpm下离心2min，收集上清液；
（2）再向下清液加入提取液A10mL，振荡2min，水浴超声10min，6000rpm下离心2min，收集上清液；
（3）重复（2）的过程。收集3次上清液，再次6000rpm下离心2min（为了使上清液固体颗粒减少，从而加快上样等步骤）；
（4）在40℃水浴条件下，减压蒸至约12mL，再加3mL甲酸混匀，待净化。
三、火腿肠
（1）将1.000g样品置于50mL 离心管，加入1.0gC18粉末，加入20mL提取液A，振荡2min，60℃水浴超声10min，6000rpm下离心2min，收集上清液；
（2）再向下清液加入提取液A10mL，振荡2min，水浴超声10min，6000rpm下离心2min，收集上清液；
（3）重复（2）的过程。收集3次上清液，再次6000rpm下离心2min（为了使上清液固体颗粒减少，从而加快上样等步骤）；
（4）在40℃水浴条件下，减压蒸至约12mL，再加3mL甲酸混匀，待净化。
四、酸奶
（1）将1.000g样品置于50mL 离心管，加入20mL提取液A，振荡2min，60℃水浴超声10min，6000rpm下离心2min，收集上清液；
（2）在40℃水浴条件下，减压蒸至约7mL左右，再加1.5mL甲酸混匀，待净化。
SPE净化步骤
SPE柱：月旭Welchrom? PA(聚酰胺)小柱，规格：1000mg/6mL。
a）活化：加入5mL甲醇活化 Welchrom? PA柱，5mL水，5mL pH=6的水，弃去流出液。
b）上样：将提取液加入 Welchrom? PA柱中，弃去流出液，注意不要让小柱溶剂流干。
c）淋洗：依次用10mLpH=4的水，20mL甲醇：甲酸（6：4），10mLpH=7的水淋洗，弃去流出液。
d）洗脱：用15mL 2%氨水：乙醇：水（2+7+1）洗脱，收集流出液，压干小柱。
e）浓缩：将收集的洗脱液在80℃水浴蒸干，再用10%甲醇水复溶并定容至2mL。
色谱条件
色谱柱：月旭Ultimate XB-C18（4.6 x 250mm, 5μm）
流动相：乙酸铵/乙腈梯度
流速：1.0mL/min
进样量：20μL
柱温：30oC
检测波长：534nm
色谱图或者加标回收率结果
图1：酸性红1标准品0.5mg/L
图2：酸性红1-红酒加标10mg/kg
图3：酸性红1-红枣加标1mg/kg
图4：酸性红1-火腿肠加标1mg/kg
图5：酸性红1-酸奶加标1mg/kg
表1：加标回收率测定结果
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