人抗血小板抗体IgM(PA-IgM)ELISA试剂盒
英文简称:Human anti-platelet antibody IgM (PA-IgM) ELISA kit
产品货号:KS18191
品牌名称:科顺生物
产品规格:96T/48T
运输方式:快递(根据客户要求,选择具体的运输方式)
产品价格:价格优惠,欢迎在线留言洽谈!
使用范围:仅供科研检测,不得用于临床.
人抗血小板抗体IgM(PA-IgM)ELISA试剂盒实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠胰岛素(INS)水平。用纯化的小鼠胰岛素(INS)捕获抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被的微孔中依次加入小鼠胰岛素(INS),再与HRP标记的检测抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的小鼠胰岛素(INS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠胰岛素(INS)含量。
人抗血小板抗体IgM(PA-IgM)ELISA试剂盒组成:
试剂盒组成 48孔配置 96孔配置 保存
说明书 1份 1份
封板膜 2片 2片
密封袋 1个 1个
酶标包被板 1×48 1×96 2-8℃保存
标准品 0.3ml×6管 0.3ml×6管 2-8℃保存
酶标试剂 5 ml×1瓶 10 ml×1瓶 2-8℃保存
样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
终止液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8℃保存
20×浓缩洗涤液 15ml×1瓶 25ml×1瓶 2-8℃保存
注:标准品浓度依次为:40、20、10、5、2.5、0 mIU/L.
人抗血小板抗体IgM(PA-IgM)ELISA试剂盒样本处理及要求:
1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.
7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
人抗血小板抗体IgM(PA-IgM)ELISA试剂盒操作步骤
1.标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.加酶:每孔加入酶标试剂100μl,空白孔除外。
4.温育:用封板膜封板后置37℃温育60分钟。
5.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。
6.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
7.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
8.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
9.测定:以空白孔调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
人抗血小板抗体IgM(PA-IgM)ELISA试剂盒注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间zuei好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,zuei好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
计算:
以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。
人抗血小板抗体IgM(PA-IgM)ELISA试剂盒相关优质产品:
KS15549 大鼠白三烯ELISA试剂盒
KS15550 大鼠组织胺ELISA试剂盒
KS15551 大鼠肝素ELISA试剂盒
KS15552 大鼠甘油二脂ELISA试剂盒
KS15553 大鼠窖蛋白(Caveolin1Cav1)ELISA试剂盒
KS15554 大鼠活化素A(ACVA)ELISA试剂盒
KS15555 大鼠趋化因子(fractalkine/CX3CL1)ELISA试剂盒
KS15556 大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKSα)ELISA试剂盒
KS15557 大鼠白介素2受体α(IL2Rα)ELISA试剂盒
KS15558 大鼠白介素28受体(IL28R)ELISA试剂盒
KS15559 大鼠白介素25(IL25)ELISA试剂盒
KS15560 大鼠白介素23受体(IL23R)ELISA试剂盒
KS15561 大鼠白介素22受体α2(IL2Rα2)ELISA试剂盒
KS15562 大鼠白介素21(IL21)ELISA试剂盒
KS15563 大鼠白介素20(IL20)ELISA试剂盒
KS15564 大鼠白介素1受体关联激酶4(IRAK4)ELISA试剂盒
KS15565 大鼠白介素1受体关联激酶2(IRAK2)ELISA试剂盒
KS15566 大鼠白介素1受体Ⅱ(IL1R2)ELISA试剂盒
KS15567 大鼠白介素1受体Ⅰ(IL1R1)ELISA试剂盒
KS15568 大鼠白介素1δ(FIL1δ)ELISA试剂盒
KS15569 大鼠白介素19(IL19)ELISA试剂盒
KS15570 大鼠白介素18结合蛋白(IL18BP)ELISA试剂盒
KS15571 大鼠白介素17F(IL17F)ELISA试剂盒
KS15572 大鼠白介素17B(IL17B)ELISA试剂盒
KS15573 大鼠白介素12B(IL12B)ELISA试剂盒
KS15574 大鼠白介素12A(IL12A)ELISA试剂盒
KS15575 大鼠白介素11受体α(IL11Rα)ELISA试剂盒
KS15576 大鼠白介素10受体β(IL10Rβ)ELISA试剂盒
KS15577 大鼠白介素10受体α(IL10Rα)ELISA试剂盒
KS15578 大鼠白蛋白启动子D位点结合蛋白(DBP)ELISA试剂盒
KS15579 大鼠白蛋白(ALB)ELISA试剂盒
KS15580 大鼠八聚体结合转录因子4(OCT4)ELISA试剂盒
KS15581 大鼠氨乙酰丙酸δ脱水酶(ALAD)ELISA试剂盒
KS15582 大鼠氨乙酰丙酸δ合酶1(ALAS1)ELISA试剂盒
KS15583 大鼠氨基己糖苷酶Bβ(HEXβ)ELISA试剂盒
KS15584 大鼠氨基端前心钠肽(NTProANP)ELISA试剂盒