培养细胞一经污染,大都较难处理。假如污染细胞价值不大,宜弃之;有细胞株留存的或可购置的,可在寻找原因后彻底消毒操作室,复苏或重新购置细胞,再培养。若污染细胞价值较大,又难于重新得到,可采纳以下办法根除。
(一)运用抗生素
抗生素对杀灭细菌较有用。联合用药比单独用药作用好。防范用药比污染后再用药作用好。防范用药一般用双抗生素(青霉素100u/mL加链霉素100μg/mL),污染后根除用药需选用大于常用量5~10倍的冲洗法,于加药后作用24~48小时,再换常规培养液。
此法在污染早期或许有用。所用抗生素品种除青霉素、链霉素外,还可用庆大霉素、卡那霉素、多粘菌素、四环素、制霉菌素等。常用400~800μg/mL卡那霉素或200μg/mL四环素处理,每隔2~3日换液1次,传1~2代进行治疗。
近年来有报导,4-氟,2-羟基喹啉(Ciprofloxacin,Cip)、截耳素衍生物(Pleu-romutilinderivative,BM-Cyclin2:BM-1和四环素衍生物(BM-2)等三种抗生素单用或合用对杀灭支原体有用。
这三种抗生素均用配成250X浓缩液,-20℃保存备用,运用浓度Cip为10μg/mL,BM-1为10μg/mL,BM-2为5μg/mL。运用时先吸除污染的培养液,参与含BM-1的RPMI1640培养液,3天后再吸除培养液,参与含BM-2的RPMI1640培养液,培养4天,如此接连3个轮次,直至用33258荧光染色镜检证明已根除支原体后,再加正常培养液培养传代3-4次。