酶联免疫法呕吐毒素检测操作步骤

^{_{试剂盒灵敏度：3ppb(ng/ml)}}

^{_{检测下限：}}

^{_{谷物、饲料…………………………150ppb}}

^{_{谷物（大米、玉米、小米等）及饲料前处理方法}}

^{_{1）称取2g粉碎样品于50ml离心管中，加10ml去离子水，振荡5分钟，室温4000转/分离心10分钟；}}

^{_{2）取0.1ml上清，加入0.9ml复溶液，混匀；}}

^{_{3）取50μl进行分析。}}

^{_{酶联免疫操作步骤：}}

^{_{6.1 编    号：将样本和标准品对应微孔按序编号，每个样本和标准品做2孔平行，并记录标准孔和样本孔所在的位置。}}

^{_{6.2 加样反应：加标准品应用液或样本50µl/孔到各自的微孔中，然后加抗体工作液50µl/孔，轻轻振荡5秒混匀，37℃避光反应30分钟。}}

^{_{6.3 洗    涤：将孔内液体甩干，用工作洗涤液250µl/孔充分洗涤5次，每次间隔30秒，最后用吸水纸拍干（拍干后未被清除的气泡可用干净的枪头刺破）。}}

^{_{6.4 加酶反应：加酶标记物100µl/孔，37℃避光反应30分钟。}}

^{_{6.5 洗    涤：同上}}

^{_{6.6 显    色：加底物液A 50µl/孔，再加底物液B 50µl/孔，轻轻振荡5秒混匀，37℃避光显色15分钟（若蓝色过浅，可适当延长反应时间）。}}

^{_{6.7 终    止：加终止液50µl/孔，轻轻振荡混匀，终止反应。}}