名称: 人胃泌素细胞抗体(GCA)ELISA试剂盒
Elisa试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。
ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA可用于测定抗原,也可用于测定抗体。
然而,影响Elisa试验结果的因素很多,故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点
检测目的:用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
上海琛艺供应的种属有:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、猪犬、牛羊、鸡鸭、植物ELISA试剂盒等
试剂盒组成及保存:
试剂盒组成 | 48孔配置 | 96孔配置 | 保存 |
说明书 | 1份 | 1份 | |
封板膜 | 2片(48) | 2片(96) | |
密封袋 | 1个 | 1个 | |
酶标包被板 | 1×48 | 1×96 | |
标准品 | 0.5ml×1瓶 | 0.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
标准品稀释液 | 1.5ml×1瓶 | 1.5ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
酶标试剂 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
样品稀释液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂A液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
显色剂B液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
终止液 | 3 ml×1瓶 | 6ml×1瓶 | 2-8℃保存 |
浓缩洗涤液 | (20ml×20倍)×1瓶 | (20ml×30倍)×1瓶 | 2-8℃保存 |
人胃泌素细胞抗体(GCA)ELISA试剂盒
技术问答
我能否在实验开始前一天收集样品?
◆ 除非试剂盒内说明书特别说明不允许,一般都可以。如果收集的样品不能够及时进行检测,请保存至-20℃或者按照说明书进行保存。应避免反复冻融。
◆ -20℃是推荐的冷藏保存温度。解冻的平衡过程可能会导致样品的降解。
我是否必需按照试剂盒内说明书中的方法准备样品?
◆ 推荐的样品准备方法是经过实验验证的的方法,所以推荐按照说明书上的方法制备样品。
我能否不用推荐的收集方法来收集血浆?
◆ 每一次按照推荐步骤操作的测定都是经过验证可行的。在某些测定中有些抗凝剂是不被推荐的。具体请参看说明书。
◆ 有些待检测的分析物也存在于血小板中,因此,推荐使用低血小板血浆。正确的收集操作方法请参看说明书。
我能否使用自己的稀释液或者缓冲液?
◆ 每个试剂盒中都含有按配方配制的与特异性样品种属相配套的稀释液,以确保待检测的样品被正确稀释。具体请参看说明书。
建议
◆ 确定待检测的样品在收集和制备时保证无菌操作。
◆ 如果要检测多个样品,将样品隔离并标记清楚以防相互污染。
◆ 检测前,将样品离心除去颗粒。将样品转移至新的离心管内,混合均匀。
◆ 在混合样品时,使用容积至少比样品体积大50%的离心管以保证混合充分。
我没有足量的稀释液去稀释所有的样品,怎么办?
◆ 试剂盒内提供说明书中所指定的足量的稀释液。能保证所有的标准品和样品检测两次。
◆ 如果没有推荐的稀释度,或者需要大量稀释,请在实验前计算出所需的稀释液总量,然后技术服务部门获取额外的稀释液。
我能否使用试剂盒内非推荐的样品类型?
◆ 试剂盒内说明书中所指定的样品类型是经过验证可行的。其它未推荐的样品类型是没有经过任何检测的。
我使用对照的检测结果都在范围外,为什么?
◆ 如果使用对照,其浓度应该是在某一特定范围内。如果对照值在范围外,则是无效测定。
试验操作中,每一个小细节都直接决议着试验的成功用与否,所以每一个过程都不能大意,以下内容针对细胞因子ELISA试剂盒的试验操给出一些小主张:
1、每次试验测定的一起做标准曲线,。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔zui高浓度的OD值),请先用样品稀释液稀释必定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以总稀释倍数(×n)。
2、制造试剂时,要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂,充沛混匀对测试成果尤为重要,zui好运用微量振荡器(运用zui低频率),如无微量振荡器,可在反响前手艺悄悄晃动酶标板1分钟,例如做圆周动作,使加入孔中的反响液混匀。
3、从2-8℃取出的试剂盒,在开启试剂盒之前要室温平衡至少30分钟。酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
4、严格按照说明书的操作进行,试验成果断定必须以酶标仪读数为准。
5、不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前运用。
6、试验用酶标仪应严格按运用说明书标准操作,并在运用前充沛预热。
7、手艺洗板应注意:甩掉酶标板内的液体;在试验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将稀释后的洗涤液至少0.35ml注入孔内,浸泡1-2分钟。根据需要,重复此过程数次。主动洗板:如果有主动洗板机,应在娴熟运用后再用到正式试验过程中。
8、底物B对光敏感,防止长时间暴露于光下。
9、为防止穿插污染,要防止重复运用手中的吸头和封板膜。
10、所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。停止液为2M硫酸,运用时必须注意安全。
11、各过程加样均应运用加样器,并常常校准其准确性,以防止试验误差。一次加样时间zui好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐运用排枪加样。