移液器常规的使用流程,只要是做过实验的都知道,一个完整的移液循环包括下面六个步骤:
移液循环6步骤
但为什么精准移液仍然是一个难题呢?接下来就要从每个步骤详细说说了,如何每一步做到标准操作,实现 0 误差!
1、吸头安装 - 旋转安装法
使用合适移液器量程的吸头,为保证良好的密封性,将移液器垂直插入吸头,左右旋转半圈,上紧即可,建议移液量在吸头的 35%-100%量程范围内。(多道移液器建议使用进口吸头)
吸头安装 - 旋转安装法
2、容量设定:粗调/细调
从大量程调节至小量程为正常调节方法,逆时针旋转刻度即可。
从小量程调节至大量程时,应先调至超过设定体积刻度,再回调至设定体积。
(不要将按钮旋出量程范围,否则会卡住机械装置,损坏移液器。)
3、润洗吸头
在安装了新的吸头或增大了容量值以后,液体吸取、排放两到三次,吸头内壁表面吸附达到饱和,确保移液工作的精度和准度;
4、吸液
不同量程移液器吸液时吸头浸液深度
0.1-2.5ul/0.5-10ul ≤ 1mm
2-20ul/10-100ul/20-200ul ≤ 2mm
100-1000ul ≤ 3mm
1000-5000ul/2-10ml ≤ 4mm
正向移液(密度低的溶液)
1. 按下按钮到停点;
2. 轻缓松开按钮到起始点完成吸液;
3. 轻按按钮至停点,排除液体;稍停片刻,继续按按钮,排空液体;
4. 松开按钮,回到原点。如果需要,更换吸头后继续移液。
反向移液(适用于粘稠液体或易挥发性液体)
1. 按下按钮至第二停点吸液,轻缓松开按钮到起始点完成吸液。吸取多于设定容量的液体;
2. 轻按按钮至第一停点,排除设定容量的液体;
3. 残留在吸头内的多余液体随吸头丢弃。
5、排液
吸头紧贴容器壁,先将排放按钮按至第一停点,稍微停顿,再按至第二停点,这样可保证吸头内无残留液体。如果仍然有残留,需要更换吸头。
6、卸去吸头
除去枪头后,将移液器调至最大量程。
在移液器操作的最后,还有几个 TIPS 务必要记得:
不要用大量程的移液器移取小体积的液体;
使用与移液器匹配的枪头;
吸液太快产生气泡,液体浸入移液器腐蚀内部;
所设量程不可超出移液器有效量程范围,损坏移液器;
吸有液体的移液器不可平放,吸头内的液体容易污染移液器内部;
移液器在每次实验后应将刻度调至最大,让弹簧回复原型以延长移液器的使用寿命;
使用时检查是否有漏液现象。吸取液体后悬空垂直放置几秒钟,看看液面是否下降。如果漏液,则检查吸头是否匹配和弹簧活塞是否正常;