PCR(PolymeraseChainReaction,聚合酶链式反应)是一种选择性体外扩增DNA或RNA的方法。它包括变性(Denature)、退火(Anneal)、延伸(Extension)三个基本步骤,再由这三个基本步骤组成一轮循环,经25~35轮循环就可使DNA扩增达106倍。由于PCR实验中,需要设置变性、退火、延伸的三个关键温度点。
只需要在不同温度的水浴锅中操作,设置好PCR实验的三个温度点(每个孔设置一个温度),即可做PCR。实验过程中,需根据PCR循环的时间设定,手动操作让不锈钢漏勺(放有PCR实验的试管)在三个孔中进行循环,并用钟表进行计时。
运用三孔三温水浴锅做PCR,具有成本低、设备简单、操作简便等优点,相信在不久的将来,该设备会在实验研究中得到很好的应用。
三孔三温水浴锅的使用方法:
1.该仪器使用220V交流电源,电源插座应采用三孔安全插座,使用前必须妥善接地。
2.使用时可按需要的容量加水,以缩短加热的时间。(注意加水不可过多,以免沸腾时水溢出锅外;并注意锅内水量不能低于水箱高度的三分之二,水量过低会造成温冲过高测温不准。长时间使用需经常加水,不能使锅内电热管露出水面,以免烧坏电热管,造成漏水)。
3.接通电源,打开电源开关,指示灯亮。
4.设定温度:按设定键SET设定指示灯SL亮,进入温度设定状态,按上调键▲向上调整0.1℃。按下调键 ▼向下调整0.1℃。再按一次SET键回到测量状态。
5.调整加热功率系数:长按设置键SET5-8秒,首位显示d.进入设定zui低加热功率系数,开机自动为3.可在1-9调整.(使用70-99.9℃时可将加热功率系数调整为5-9即可)。
使用注意事项
使用应先加水,使加热管全部在水中,加水根据需要而定,不允许加热管暴露在外。接通电源,让指示灯亮。
1、指针温控仪使用方法:调节温控旋钮,对准所需温度值,上表指针指示实际温度,当实际低于设定温度时,绿灯亮,加热器工作,反之则相反。
2、温控仪使用方法:
2.1.设定温度:按SET可设定温度设定点。按一下SET键数码管字符开始闪动,表示仪表进入设定状态,按△键设定值增加,按▽键设定值减小,长按△键或▽键数据会快速变动,再一次按SET键仪表回到正常工作状态温度设定完毕,仪表回到正常工作状态
2.2.内部功能参数设定: 按SET键3秒仪表进入内层参数设定状态。以后每按一次设定键仪表依次出现下述参数:
E:是提前控制量参数,为减少温度过冲,仪表控制加热输出时会提前截止加热。
在设定值与提前量范围内输出(继电器)是不动作的,这样可防止温度过冲并减少继电器动作次数以利延长继电器寿命。
例:若设定值是50.0℃,提前量为0.5,仪表控制加热到49.5.0℃时继电器释放,温度下跌到50.0℃-0.5℃=49.5℃时继电器又吸合。提前量越大继电器动作次数越少,提前量过大会降低控制精度。
除可用于分子生物学PCR实验和PCR研究实验外,三孔三温水浴锅还可进行中学生物中温度对酶活性的影响实验、酶的专一性探究实验等。运用温度控制器加一些附属设备,还可自制植物培养箱、微生物培养箱、干燥箱等,广泛用于各种实验。