CO2培养箱的正面有操作盘，盘上设有电源开关，温度调节器(手动式和液晶显示盘)，CO2注入开关，CO2调节旋扭，湿度调节旋扭，温度显示盘，CO2显示盘和湿度显示盘，二氧化碳样品孔(用于抽取箱内的样品，以检测箱内的CO2是否达到显示盘上所显示的含量)和报警装置(超温报警灯)。
(1) 培养箱应放置于位置比较平稳，并远离热源的地方，以防止温度波动和微生物的污染。
(2) 在接通电源前，应按照使用说明书，在培养箱内加入一定的蒸馏水(所加入的水最好加入一定量的消毒剂，详见说明书)，以免烧坏机器。
(3) 当水加到一定量后，报警灯亮，即停止加水，打开电源开关，即开始加温，将温度控制器调到所需温度。
(4) 当温度达到所需温度时，则自动停止加热，超过所需温度时，超温报警灯亮，并发出报警声。
(5) 培养箱所用的CO2可以用液态CO2或气体，无论用哪种CO2给供的管子不能太变曲，以保证气体的畅通。一般选用CO2钢瓶，接上压力控制表即可。
(6) CO2含量的调零，在箱内温度和湿度稳定后(一般须三天)，旋动CO2 调节旋扭，使显示盘的数字调到0.00，过5分钟后如需要再重复调整，直到显示盘上的读数稳定为止。打开CO2注入开关 (注入灯亮)，将CO2设定值调到所需浓度，使浓度达到设定值浓度后(注入灯熄灭)，并至少维持10分钟。此后则由CO2控制器自动调节箱内的CO2含量。
(7) CO2培养箱湿度的调整。先将湿度调节旋扭按下，再将湿度调节旋扭转动至所需培养湿度，此后由湿度调节器自动调整湿度。
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