二氧化碳培养箱作为精密培养设备,要求CO2浓度、温度、控制精度高,误差小,使生物细胞,组织等的培养成功率、效率都得到改善。相对于普通培养箱,二氧化碳培养箱具有不可替代优势性能。
为什么大多数细胞培养需要用二氧化碳培养箱?用普通培养箱不行吗?
我们知道,一般细胞培养液的pH在7.0-7.4之间,由于碳酸盐pH缓冲系统是一种生理pH缓冲系统(它是人体血液中最重要的pH缓冲系统),大多数培养液用它来保持稳定的pH。用粉末配制培养液时,常常需要加入一定量的碳酸氢钠。
而对大多数以碳酸盐作为pH缓冲系统的培养液而言,为了维持稳定的pH,培养箱中的二氧化碳需要维持在2-10%之间,以保持培养液中溶解的二氧化碳的浓度。同时细胞培养的器皿需要一定程度的透气,以便于气体的交换。
那么采用其他pH缓冲系统是不是就不需要二氧化碳培养箱了呢?人们发现由于空气中的二氧化碳浓度很低,如果细胞不在二氧化碳培养箱中培养,培养液中的HCO3-会被耗尽,这样会影响细胞的正常生长。所以大部分动物细胞的培养,还是需要二氧化碳培养箱。细胞培养液中常附加其他的pH缓冲系统,比如HEPES缓冲系统,来增加pH缓冲能力。在pH7.2-7.4之间有很强的缓冲能力,当透气的培养器皿被拿到二氧化碳培养箱外面的时候,由于空气中二氧化碳浓度很低,培养液中碳酸盐缓冲系统就会失去效果,这时候缓冲系统就能继续保持pH的稳定。
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