PCR的分类

来源:网络  作者:网络转载   2019-10-04 阅读:676

  PCR仪是利用升温使DNA变性,用限制性内切酶使DNA双链解链,在聚合酶的作用下使单链复制成双链,进而达到基因复制的目的。
  PCR的分类
  根据DNA扩增的目的和检测的标准可以将PCR仪分为:普通PCR仪,梯度PCR仪,原位PCR,实时荧光定量PCR仪等几类。
  1、普通PCR仪
  一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪,称之为普通PCR仪,也就是传统的PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。普通PCR仪主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。
  2、梯度PCR仪
  一次性PCR扩增可设置一系列不同的退火温度条件的称之为梯度PCR仪。不同的DNA片段其最适合的退火温度不同,通过设置一系列的梯度退火温度进行扩增,从而一次性PCR扩增就可以筛选出表达量高的最适合退火温度进行有效的扩增。
  梯度PCR仪主要用于研究未知DNA退火温度的扩增,这样既节约时间,也节约成本。在不设置梯度的情况下亦可当做普通的PCR用,多应用于科研、教学机构,检验、检疫等。
  3、原位PCR仪
  原位PCR是保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶DNA所在的位置上进行基因扩增。不但可以检测到靶DNA,而且还可以了解靶DNA存在于何种细胞中,更有利于探讨靶DNA与细胞之间的关系。
  原位PCR仪主要应用于:检测外源性基因片段,提高检出率,集中在病毒感染的检查上;观察病原体在体内分布规律、内源性基因片段;检测导入基因;遗传病基因检测。
  4、实时荧光定量PCR仪
  在普通PCR仪设计基础上增加荧光信号采集系统和计算机分析处理系统,形成了具有荧光定量功能的PCR仪器。在PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统,得出量化的实时结果输出。

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