微孔板材料的固有污染如何控制?
北京亘辰科技有限公司 Frank Han
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文章介绍
在先前的独立评估报告(“Extractables Testing in Deep Well Plates”, 2005)中,已表明,市面上销售的许多品牌的微孔板使用低级聚丙烯聚合物,内含显著水平的浸出物污染。(即具有严重污染)
肯特大学化学系代表Porvair Sciences R&D对市面上的商业化微孔板做进一步和更详细的的研究。在许多商业化微孔板的样品中再次发现有显着性水平的浸出物污染。这项新实验不仅测试了“天然”聚丙烯微孔板,而且测试了更广泛的彩色和黑色的微孔板。
该研究于2013年初进行,提供了来自欧洲,美国和中国的众多制造商的大量微孔板的实验数据。质谱数据显示:在测试的微孔板中发现了来自原材料的浸出物污染非常显著。
研究背景
在本文中确定浸出物污染比较复杂,长链烃污染物在任何光谱中定会引发外源荧光信号,甚至在大规模筛选中会引起全细胞凋亡或停滞的假阳性。在法医学中,这些浸出物污染很容易掩蔽滥用的药物或其代谢物并引起离子抑制,导致定量不准确。
研究方法
从各品牌制造商处获得用于测试的微孔板样品。选择新的未使用的板,用干净,干燥的压缩空气流去除可能积聚的任何颗粒物。通过在每个样品板的三个孔中孵育适当体积的HPLC级甲醇过夜来进行聚合物浸出和可提取污染物的测试。甲醇中加入10ug / ml的Caffeine 作为内标。将板用封膜机密封并静置过夜。过夜孵育后,250℃下对每个孔样品的1ul等分试样,并在GC-MS系统上使用不分流进样进行分析。
实验结果
绿色表示无污染。 黄色表示轻微的污染,只有一种污染物,且不一定在三个测试孔中都出现。红色表示污染非常严重。
Description | I.D. | Results |
Porvair 2ml square well plate | D | Extractibles Free |
Porvair 1ml round well plate | E | Extractibles Free |
Porvair 1ml round well black plate | F | Extractibles Free |
Porvair 1ml round well red plate | G | Extractibles Free |
Porvair 1ml round well blue | H | Extractibles Free |
European 1.6ml low profile storage plate | A | Minor Contaminant |
USA 10ml starge plate | B | Minor Contaminant |
USA 2ml deep well plate | J | Minor Contaminant |
USA 1ml round well plate | N | Minor Contaminant |
USA 48 well deep well plate | C | Significant Contaminant |
China sourced 2ml deep well plate | I | Significant Contaminant |
European microcentrifuge tubes, black | L | Significant Contaminant |
European 1ml round deep well plate | M | Significant Contaminant |
USA 2ml square well deep well plate | Q | Significant Contaminant |
European 2ml square well, round bottomed plate | S | Significant Contaminant |
本研究中使用的板/管来自美国和欧洲、中国的不同来源的制造商。
污染物识别
将提取的污染物与NIST数据库进行比较以鉴定所涉及的化学品。这些化学品显示为注塑过程中的塑料增强剂和模具流动剂的组合。
污染物 | 商业用途 |
丙烯酰胺 | 防结块剂、润滑剂 |
十二烷酸 | 脱模剂 |
十六烷酸、甲酯 | 软化剂、加速剂 |
十八烷酸、甲酯 | 塑料润滑剂 |
9-十八碳烯酸、油酸 | 塑料润滑剂、脱模剂 |
实验结论
本实验中发现来自不同品牌的微孔板显示浸出物污染严重。某些制造商在生产微孔板时使用低等级聚丙烯,含有流动改性添加剂或“脱模剂”用于简化生产及模制过程。
结果表明,高质量医疗级聚丙烯虽然容易获得,但是超过一半的测试板表现出不同程度的浸出物污染,与2005年的独立实验室测试一样,所有Porvair科学公司的深孔板均显示无污染。
建议
建议定期评估用于在有机溶剂中长期储存样品的微孔板,以检查是否有浸出物污染。在进一步分析储存化合物或样品之前,应从制造商处获得微孔板的纯度证书。在不清楚是否有污染的情况下,应进行浸出物污染测试,以防止有价值的化合物或样品面临被污染的风险。
关于Porvair科学
Porvair科学,微孔板产品的制造专家,服务生命科学,生物技术,医药研发和分子生物学的微孔板解决方案的所有应用。也为各大品牌生物公司设计zui通用的过滤板,包括Waters,Millipore,Qiagen,Whatman,GE Healthcare,Varian,Biotage、当然还有Porvair。