“膜”法学院之常见问题解决篇—困扰多时的问题都有解答了!

来源:网络  作者:网络转载   2019-10-10 阅读:958

上期我们为您介绍了如何根据您的实验需求选择合适的超滤管,本期我们总结了超滤管使用过程中经常遇到的问题,分析问题产生的原因并给您一个的解决方案。

 

超滤膜一次使用就碎了?可能和我们的离心机有关系

 

超滤管如果离心转速过高,可能会导致膜甚至管子的破裂。离心机的转速与离心机的半径以及离心力都有关系,不同半径的离心机,相同转速出来的离心力也不一样,可以公式换算!说明书中明确指出使用超滤管的大转速和离心力,做实验时要根据不同品牌的超滤管调整到离心力的承受范围内。另外,超滤管在离心机中的摆放也是有讲究的,使用角转子时,超滤管放置方式要求印有刻度一侧朝上|朝外(这样双面膜才能发挥切向流的作用),使用水平转子没有特殊要求;要不也会发生破裂哦~在浓缩管中加入样品,不得超过大体积。(以Turbo15 为例,若使用水平转子不得超过15ml 样品,若角转子则9ml

 

 

双面垂直膜--窗口朝上

单面垂直膜--刻度面朝上

 

另外,还要注意的是,离心15ml或是50ml外管的超滤管zui好使用尖底的转子,因为超滤管的底部是尖底的。如果使用圆底的转子,有可能无法把样品管放满,或是会增加外管底部磨损破损的几率。

 

脱盐浓缩,一个超滤管就可以搞定

浓缩用超滤管,脱盐用透析袋或脱盐柱,这是很多实验室一直沿用的实验操作。其实呢,超滤管做“脱盐+浓缩”,也是很多蛋白操作高手的小诀窍。而如果你的样品量有几十毫升甚至几升,选择赛多利斯的超滤膜包会在一小时之内完成自动换液,非常的方便哦!

另外,赛多利斯的超滤管也有针对于换液的特殊设计:

a.加2ml样品到浓缩管

b.清空滤过管

c.插入渗滤小管到浓缩管,加入10ml去离子水或是缓冲液。旋上盖子

d.重复浓缩步骤,会有98%的无机盐滤过

e.去除渗滤小管,回收浓缩后的样品

 

 

我用浓缩后的蛋白做下游分析时发现有干扰,可能原因

 

超过滤薄膜含有微量甘油和NaN3 如果此材料干扰分析,可用缓冲液或去离子水预清洗。如果干扰仍然存在,用0.1 N NaOH清洗,然后用缓冲液或去离子水再次清洗后甩干。同样需要强调的是,如果用NaOH处理,可能会对RC膜有一定影响,所以,尽量选择PES膜并且避免过夜浸泡。

 

Vivaspin超滤管系列具有的尖角死体积样品安全保护技术,防意外甩干,给珍贵的样品更多一道保障!另外,根据蛋白的分子量和体积的不同,Vivaspin系列有多达24种不同选择。样品处理体积包括从100μl20ml,截留分子量也涵盖了2KDa0.2um

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