尺寸排阻色谱柱的清洗流程

来源:网络  作者:网络转载   2019-10-10 阅读:848

    尺寸排阻色谱柱包括分子量测定范围不同的5种规格的色谱柱,可以将适合样品分子量和分子量分布的不同级别的色谱柱串联起来进行分析。尺寸排阻色谱柱通过优化填料的粒径和细孔容积,实现了色谱柱性能的提升,和色谱柱操作压强的降低。特别是对单克隆抗体三聚体/二聚体/单体的分离性能有很大的提高,对单体/片段也有很好的分离效果。

  尺寸排阻色谱柱为了方便根据待测成分的分子量来选择合适的色谱柱,按照凝胶表面孔的大小分成了很多种类。各种色谱柱的排阻界限分子量在产品目录上都有详细记录,使用的时候要按照待测样品zui大分子量不超过尺寸排阻色谱柱的排除界限分子量的规则来进行选择。另外,在不超过排除界限分子量的前提下,尽量选择排除界限分子量小的色谱柱比较合适。

  尺寸排阻色谱柱一般清洗流程如下:

  1. 将色谱柱与检测器断开;

  2. 将色谱柱反接后进行冲洗;

  3. 在低于50%zui大推荐流速的条件下冲洗色谱柱。注意柱压的变化。如果柱压超出正常水平许多,可降低流速或更换低粘度的缓冲液作为冲洗溶剂;

  4. 一般用清洗溶液冲洗10-15倍柱体积即可。更换溶液时请用3-5倍柱体积的经蒸馏的去离子水将尺寸排阻色谱柱冲洗干净。

  尺寸排阻色谱柱为外来体分离和纯化:

  尺寸排阻色谱柱包含具有约75纳米的孔隙尺寸的树脂。蛋白质和其他污染分子比外来体小进入的树脂的孔,并在通过该柱的通道被延迟,在以后的级分洗脱。当与TRPS测量结合使用QEV列导致更高质量的外来体的测量和分析。

标签: 色谱
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