非常让人着迷的实验,其成功关键之一是选择可信的实验试剂。
我司细胞近3000种,来源于美国ATCC,细胞都是经过严格质量控制,在中国大陆努力搭建正牌细胞与国内广大科研人员之间的沟通桥梁。为您提供人膀胱成纤维细胞外,还有更多相关实验产品,标准品,细胞株和实验技术服务等等前期后续服务。
人膀胱成纤维细胞的产品介绍
人膀胱成纤维细胞由我司特价销售人膀胱成纤维细胞。
人膀胱成纤维细胞细胞株
Q1. 人膀胱成纤维细胞液体培养基的保存是冷藏好?还是冷冻好?
要冷藏!!因为液体培养基经冷冻后再经溶化时,其溶液的pH值会发生改变,溶液往往变碱,某些成分溶解也会受到影响对细胞生长不利。故液体培养基一定要存放在冷藏箱中,通常液体培养基在冷藏条件下可存放6个月 ~ 一年。
Q2.人膀胱成纤维细胞 液体培养基中谷氨酰胺的作用,及使用方法。
几乎所有的细胞对谷氨酰胺有较高的要求,细胞需要谷氨酰胺合成蛋白质,在缺少谷氨酰胺时,细胞生长不良而死亡。所以,各种培养液中都含有较大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不稳定,应置-20 ?C冰冻保存,用前加入培养基中。加有谷氨酰胺的液体培养基4 ?C 冰箱储存两周以上时,应重新加入原来量的谷氨酰胺。基础医学细胞中心在其服务项目中配制分装了高浓度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml完全培养基中,其终浓度为2mM/ml培养基。包装为粉红色,-24?C保存。
Q3.细胞计数及存活测试
1、原理:
(1)计算细胞数目可用血球计数盘或是Coultercounter粒子计数器自动计数。
(2)血球计数盘一般有二个chambers,每个chamber中细刻9个1mm2大正方形,其中4个角落之正方形再细刻16个小格,深度均为0.1mm。当chamber上方盖上盖玻片后,每个大正方形之体积为1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用时,计数每个大正方形内之细胞数目,乘以稀释倍数,再乘以104,即为每ml中之细胞数目。
(3)存活测试之步骤为dyeexclusion,利用染料会渗入死细胞中而呈色,而活细胞因细胞膜完整,染料无法渗入而不会呈色。一般使用蓝色之trypan blue染料,如果细胞不易吸收trypan blue,则用红色之Erythrosin bluish。计算细胞活率:活细胞数/(活细胞数+死细胞数)×100%。计数应在台盼兰染色后数分钟内完成,随时间延长,部分活细胞也开始摄取染料;因为台盼兰对蛋白质有很强的亲和力,用不含血清的稀释液,可以使染色计数更为准确。
Q4.细胞特性
在细胞培养之前,我们要了解一下你所要养细胞的基本特性,这点可以从细胞的产品说明书或者从ATCC细胞库查询。除此之外我们还要知道每管细胞的数量,建议分裂或传代的比例,和已知细胞的传代代次等信息。
Q5.准备培养基
复苏细胞时需要准备合适的培养基,血清和细胞生长所需的添加剂。大部分培养细胞所用的培养体系,可以在订购细胞系时获得。
虽然大多数细胞系可以在不止一种培养基中生长,但是当培养基改变时,细胞的性质也会变化。因此,使用细胞库推荐的培养基来培养细胞会获得zui好的效果。
Q6.开启冻存管
1.准备一个培养瓶,加入适宜细胞培养的培养基,液体体积按照说明书的推荐配置,并平衡培养基的温度和pH(CO2)。
2.在37℃水浴中或细胞的正常生长温度下将冻存管轻轻摇动。解冻要快,约2分钟或直到冰晶融化即可。
3.从水浴中取出冻存管并用浸泡或喷洒70%乙醇的方式来消毒。进一步的操作均需在无菌操作台中严格无菌条件下进行。
4.拧开冻存管的管帽并将内容物转移到一个含有9 ml推荐培养基的无菌离心管中。通过温和离心(125×g 10 min)除去冷冻保护剂(DMSO)。弃去上清,并用1或2 ml完全培养基重悬细胞。将这些细胞悬液转移到含有完全培养基的培养瓶中并轻轻摇动以彻底混匀。
5.培养24小时后检查细胞状态并在需要时进行传代。
Q7. 人膀胱成纤维细胞 培养用液pH对细胞生长的影响
由于,大多数细胞适宜pH为7.2~7.4,偏离此范围对细胞将产生有害的影响。各种细胞对pH的要求也不完全相同,原代培养细胞一般对pH变动耐受差,无限细胞系耐受力强。
但总体来说,细胞耐酸性比耐碱性强一些,偏酸环境中更利于细胞生长。因此,我们在配制培养用液时,可把液体的pH稍微调得偏酸一些。液体在经过0.10um或0.22um滤膜过滤时,溶液的pH还会向上浮动0.2左右。
人膀胱成纤维细胞质量可靠,售后有保障(编辑:tanxi)