魔芋又名蒟蒻,是天南星科魔芋属多年生草本植物。其主要有效成分是魔芋葡甘聚糖(KGM),它是一种的天然膳食纤维,具有防癌、防肥胖、防糖尿病、降血脂、降血糖和血胆固醇的食疗功能。魔芋粉的应用范围逐渐在扩大,同时魔芋凝胶食品也越来越受消费者的喜爱,因此魔芋凝胶食品中葡甘聚糖含量的测定尤为重要。目前,葡甘露聚糖含量的测定方法有多种,主要有费林滴定法、甘露糖腙重量法、苯酚比色法和3,5-二硝水杨酸比色法、液相色谱法和气相色谱法等,费林滴定法、甘露糖腙重量法、苯酚比色法和3,5-二硝水杨酸比色法都是测定还原糖的总量,测得的结果比实际的大,液相法用的视察检测器灵敏度不高,气相色谱法单糖衍生化复杂,而目前以甘露糖为标准的紫外分光光度法也可以用来测定多糖的含量,在浓硫酸溶液中甘露糖脱水生成5-羟甲基-2-呋喃醛,在NaCl-H3BO3存在下,5-羟甲基-2-呋喃醛转化为5-氯甲基-2-呋喃醛,5-氯甲基-2-呋喃醛的量和甘露糖的量呈线性关系。魔芋粉中葡甘聚糖含量的测定采用的是3,5-二硝基水杨酸比色法,但是在测定魔芋凝胶食品中葡甘聚糖含量的未见报道。因此,本实验以甘露糖为标准,用紫外分光光度法测定魔芋凝胶食品中葡甘聚糖含量,并与3,5-二硝基水杨酸比色法进行比较。
仪器准备
UV1700系列 紫外可见分光光度计
UV1700PC UV Visible Spectrophotometer
简介 : 本产品采用全新设计的比例监测双光束学系统,具有优良的光学性能,使用方便,是实验室分析必备的基本仪器之一。
应用领域: 各种涉及水和废水分析领域的通用仪器,应用范围包括市政和工业废水、饮用水、加工过程用水、地表水、冷却水和锅炉补给水等。
样品处理:
将魔芋凝胶食品沥干后,放入多功能粉碎机里,用干燥烧杯取样20g(准确至0.0001g,同时做水分),用约100mL85%乙醇洗涤多次洗涤(洗去游离的单糖和低聚糖),再用无水乙醇洗涤,放入50℃烘箱中将样品烘干为止。将烘干的魔芋凝胶干物质转移入250mL磨口锥形瓶,加入40mL蒸馏水及(1+1)盐酸20mL,沸水浴回流2h.停止回流后,迅速流水冷却。加NaOH(4mol/L)溶液中和水解液至pH值为7,加入20%乙酸铅5mL。水解液转移到100mL容量瓶,定容后摇匀,过滤,待用。
测定结果: