实验室等级划分

实验室生物安全防护实验室是指：实验室的结构和设施、安全操作规程、安全设备能够确保工作人员在处理含有致病微生物及其毒素时，不受实验对象侵染，周围环境不受污染。根据微生物及其毒素的危害程度不同，分为四级，一级zui低，四级zui高。生物安全防护一级实验室一般适用于对健康成年人无致病作用的微生物；二级适用于对人和环境有中等潜在危害的微生物；三级适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物或其毒素；四级适用于对人体具有高度的性，通过汽溶胶途径传播或传播途径不明、目前尚无有效疫苗或治疗方法的致病微生物或其毒素。P1实验室：实验室具备跟一般微生物学实验室相同等级的设备.若在此级实验室内同时进行非基因重组的实验时,需明确划分实验区域,小心进行操作.进行实验时,宜关闭实验室的门窗.每日实验结束时需灭菌实验台,如实验中发生污染,需立即加以灭菌.实验所产生之所有生物材料废弃物,需尽快灭菌后再依院方「感染性废弃物管理」相关办法丢弃.被污染的器具需先经灭菌后,再清洗使用或丢弃.不得用口做吸量操作.实验室内禁止饮食,吸烟及保存食物.操作重组体之后,或离开实验室之前要洗手.在所有操作中,应尽量避免产生气雾.要从实验室搬离被污染物品时,必需将其放入坚固且不漏的容器,在实验室内密封后才可运出.防除实验室的非实验用生物,如昆虫及鼠类等.若有其他方法可用,应避免使用针头.实验用衣物的使用,需遵从计画主持人的指示.需遵守计划主持人所订之其他事项.

p2实验室：

1、 符合BSL-2实验室建设要求。

2、 实验室门口带锁并可自动关闭。实验室的门应

有可视窗。

3、 有足够的存储空间摆放物品以方便使用。在实

验室工作区域处还有供长期使用的存储空间。

4、 在实验室的工作区域处应有存放个人衣物的条

件。

6、 在实验室所有的建筑内配备高压蒸汽灭菌器，

并按期检查和验证，以保证符合要求。

7、 在实验室内配备生物安全柜。

8、 设洗眼设施，必要时应有应急喷淋装置。

9、 考虑机械通风，如使用窗户自然通风，有防虫

纱窗。

10、有可靠的电力供应和应急照明。必要时，重要

设备如培养箱、生物安全柜、冰箱等应设备用

电源。

11、实验室出口有在黑暗是可明确辨认的标识。

P3实验室

全称叫“生物安全防护三级实验室”。P是英语protect 保护 的缩写。整个实验室完全密封，室内处于负压状态，从而使实验室内部的气体不会跑到外面而造成污染

三级生物安全防护实验室
安全设备和个体防护
 实验室中必须安装Ⅱ级或Ⅱ级以上生物安全柜。所有涉及感染性材料的操作应在生物安全柜中进行。当这类操作不得不在生物安全柜外进行时，必须采用个体防护与使用物理抑制设备的综合防护措施。
 在进行感染性组织培养、有可能产生感染性气溶胶的操作时，必须使用个体防护设备。
当不能安全有效地将气溶胶限定在一定范围内时，应使用呼吸保护装置。
 工作人员在进入实验室工作区前，应在专用的更衣室(或缓冲间)穿着背开式工作服或其他防护服。工作完毕必须脱下工作服，不得穿工作服离开实验室。可再次使用的工作服必须先消毒后清洗。
工作时必须戴手套(两副为宜)。一次性手套必须先消毒后丢弃。
 在实验室中必须配备有效的消毒剂、眼部清洗剂或生理盐水，且易于取用。可配备应急药品。 
 实验室设计和建造的特殊要求 ：
选址
三级生物安全防护实验室可与其他用途房屋设在一栋建筑物中，但必须自成一区。该区通过隔离门与公共走廊或公共部位相隔。 
平面布局
a)三级生物安全防护实验室的核心区包括实验间及与之相连的缓冲间。
b)缓冲间形成进入实验间的通道。必须设两道连锁门，当其中一道门打开时，另一道门自动处于关闭状态。如使用电动连锁装置，断电时两道门均必须处于可打开状态。在缓冲间可进行二次更衣。
c)当实验室的通风系统不设自动控制装置时，缓冲间面积不宜过大，不宜超过实验间面积的八分之一。
d)Ⅱ级或Ⅲ级生物安全柜的安装位置应远离实验间入口，避开工作人员频繁走动的区域，且有利于形成气流由“清洁”区域流向“污染”区域的气流流型。

围护结构
a)实验室(含缓冲间)围护结构内表面必须光滑耐腐蚀、防水，以易于消毒清洁。所有缝隙必须加以可靠密封。
b)实验室内所有的门均可自动关闭。
c)除观察窗外，不得设置任何窗户。观察窗必须为密封结构，所用玻璃为不碎玻璃。
d)地面应无渗漏，光洁但不滑。不得使用地砖和水磨石等有缝隙地面。
e)天花板、地板、墙间的交角均为圆弧形且可靠密封，施工时应防止昆虫和老鼠钻进墙脚。 
通风空调
a)必须安装独立的通风空调系统以控制实验室气流方向和压强梯度。该系统必须确保实验室使用时，室内空气除通过排风管道经过滤排出外，不得从实验室的其他部位或缝隙排向室外；同时确保实验室内的气流由“清洁”区域流向“污染”区域。进风口和排风口的布局应使实验区内的死空间降低到zui小程度。
b)通风空调系统为直排系统，不得采用部分回风系统。
c)环境参数：相对于实验室外部，实验室内部保持负压。实验间的相对压强以－30Pa～－40Pa为宜，缓冲间的相对压强以－15Pa～－20Pa为宜。实验室内的温、湿度以控制在人体舒适范围为宜，或根据工艺要求而定。实验室内的空气洁净度以GB 50073—2001《洁净厂房设计规范》中所定义的七级至八级为宜。实验室人工照明应均匀，不眩目，照度不低于500lx。
d)为确保实验室内的气流由“清洁”区域流向“污染”区域，实验室内不应使用双侧均匀分布的排风口布局。不应采用上送上排的通风设计。由生物安全柜排出的经内部过滤的空气可通过系统的排风管直接排至大气，也可送入建筑物的排风系统。应确保生物安全柜与排风系统的压力平衡。
e)实验室的进风应经初、中、三级过滤。
f)实验室的排风必须经过滤或加其他方法处理后，以不低于12m／s的速度直接向空中排放。该排风口应远离系统进风口位置。处理后的排风也可排入建筑物的排风管道，但不得被送回到该建筑物的任何部位。
g)进风和排风过滤器必须安装在实验室设在围护结构上的风口里，以避免污染风管。
h)实验室的通风系统中，在进风和排风总管处应安装气密型调节阀门，必要时可完全关闭以进行室内化学熏蒸消毒。
i）实验室的通风系统中所使用的所有部件均必须为气密型。所使用的过滤器不得为木框架。
j）应安装风机启动自动联锁装置，确保实验室启动时先开排风机后开送风机。关闭时先关送风机后关排风机。
k)不得在实验室内安装分体空调器。
6.3.2.5 安全装置及特殊设备
a)必须在主实验室内设置Ⅱ级或Ⅲ级生物安全柜。其安装位置应满足6.3.2.5　d)中的要求。
b)连续流离心机或其他可能产生气溶胶的设备应置于物理抑制设备之中，该装置应能将其可能产生的气溶胶经过滤器过滤后排出。在实验室内所必须设置的所有其他排风装置(通风橱、排气罩等)的排风均必须经过过滤器过滤后方可排出。其室内布置应有利于形成气流由“清洁”区域流向“污染”区域的气流流型。
c)实验室中必须设置不产生蒸汽的高压灭菌锅或其他消毒装置。
d)实验间与外部应设置传递窗。传递窗双门不得同时打开，传递窗内应设物理消毒装置。感染性材料必须放置在密闭容器中方可通过传递窗传递。
e）必须在实验室入口处的显著位置设置压力显示报警装置，显示实验间和缓冲间的负压状况。当负压指示偏离预设区间必须能通过声、光等手段向实验室内外的人员发出警报.可在该装置上增加送、排风过滤器气流阻力的显示。
f）实验室启动工作期间不能停电。应采用双路供电电源。如难以实现，则应安装停电时可自动切换的后备电源或不间断电源，对关键设备(生物安全柜、通风橱、排气罩以及照明等)供电。
g)可在缓冲间设洗手池：洗手池的供水截门必须为脚踏、肘动或自动开关。洗手池如设在主实验室，下水道必须与建筑物的下水管线分离，且有明显标志。下水必须经过消毒处理。洗手池仅供洗手用，不得向内倾倒任何感染性材料。供水管必须安装防回流装置。不得在实验室内安设地漏。 
其他
a)实验台表面应不透水，耐腐蚀、耐热。
b)实验室中的家具应牢固。为易于清洁，各种家具和设备之间应保持一定间隙。应有专门放置生物废弃物容器的台(架)。家具和设备的边角和突出部位应光滑、无毛刺，以圆弧形为宜。
c)所需真空泵应放在实验室内。真空管线必须装置在线过滤器。
d)压缩空气等钢瓶应放在实验室外。穿过围护结构的管道与围护结构之间必须用不收缩的密封材料加以密封。气体管线必须装置在线过滤器和防回流装置。
e)实验室中应设置洗眼装置。
f)实验室出口应有发光指示标志。
g)实验室内外必须设置通讯系统。
h)实验室内的实验记录等资料应通过传真机发送至实验室外。

P4实验室

　　P4实验室是从事致病性微生物实验的单位，作为各类传染病菌(毒）研究操作的基本单元，实验室必须有防止致病性微生物扩散的制度和人体防护措施；不同危害群的微生物，必须在不同的物理性防护条件下操作，一方面防止实验人员和其他物品受污染，同时也防止其释放到环境中。

　　所谓物理性防护，是由隔离设备、实验室的设计及实验实施等3个方面组成，根据其密封程度的不同，国际上将其分为P1、P2、P3和P4共四个生物安全等级。“P”是英文Protect（保护）的缩写。第四级即P4实验室是生物安全zui高等级，可有效阻止传染性病原体释放到环境中，同时为研究人员提供安全保证。

　　传染病的传染性和危害性是不同的，传染病原分为四个危害等级。*级危害群微生物：与人类成人健康和疾病无关；第二级危害群微生物：在人类所引起的疾病很少是严重的，而且通常有预防及治疗的方法；第三级危害群微生物：在人类可以引起严重或致死的疾病，可能有预防和治疗的方法；第四级危害群微生物：在人类可以引起严重或致死的疾病，但通常无预防和治疗的方法，如炭疽杆菌、霍乱弧菌、埃博拉病毒、天花病毒等。

　　探秘 P4实验室

　　　P4实验室是全球生物安全zui别的实验室，目前中国大陆还没有。 P4实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人体具有高度的性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明，目前尚无有效的疫苗或治疗方法的致病微生物及其毒素。与上述情况类似的不明微生物接触，也必须在 P4实验室中进行。待有充分数据后再决定此种微生物或毒素应在 P4实验室还是在较低级别的实验室中处理。正因为如此，有人把 P4实验室叫做“魔鬼实验室”，这个实验室中装有特殊的空调系统，进入这里的空气温度与湿度都是预先设定好的，过滤程度达到99.999％，能保障空气在整个环境中一小时循环多次。实验室采用定向负压系统，其核心区的压强达到负40帕，这样实验室空气的流动，只能是通过过滤器从外面进来，而保证实验室内的空气不向外流动。

　　P4实验室的设计不尽相同，典型的 P4实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。在实验室的四周装有空气过滤器。到达实验室的核心区，总共有10道门，zui里面的7道门是互锁的，也就是说，如果一道门没有关好，另一道门肯定打不开，这样避免空气的流通。更衣区依次为外更衣室、淋浴室和内更衣室。消毒区为化学淋浴室，工作人员离开主实验室时首先经过化学淋浴消毒正压防护服表面。核心区任何相邻的门之间都有自动连锁装置，防止两个相邻的门被同时打开。对于不能从更衣室携带进出主实验室的材料、物品和器材，应在主实验室墙上设置具有双门结构的高压灭菌锅、浸泡消毒槽、熏蒸室或带有消毒装置的通风传递窗，以便进行传递或消毒。核心区里配有生物安全柜、超低温冰箱、离心机、电热细胞培养柜、显微镜和实验台、小型动物实验室等。生物安全柜顶上有一个直径0.5米左右的粗管子，直接通到房顶，它也是负压状态的，一些主要的操作都需要在生物安全柜中进行。

　　从 P4实验室拿出的相关的物品必须通过高压灭菌锅消毒后，再用洁净袋充分包装，然后通过传递窗传到准备间。离开 P4时，核心区的工作人员要相互间把全身从上到下消毒一遍才能走到缓冲间，在缓冲间除去外层防护服、口罩、外层手套，然后将这些放入灭菌容器或消毒袋内。关闭实验室门之后，再取下防护眼镜，将其放入传递窗进行消毒。然后，工作人员经过另外一个缓冲间，退到准备间。在这里他们才可以取下身上所有的防护器具，立即在沐浴室洗澡后，才可离开实验室。 P4实验室有严格、复杂的管理程序，为了保证 P4实验室的安全，只有得到批准和持有磁卡通行证的人才能进入，有的通过指纹门禁系统进入，而且所有出入的人员都由电脑记录在案。

　　zui先进的 P4实验室在法国

　　法国第二大经济城市里昂是重要的医药工业研究、生产基地，有许多的医药生产企业、研究实验室和生物工业开发园区，那里有目前世界上zui先进的高危病毒实验室———让．梅里厄 P4实验室。这个实验室1999年3月开始运作，目标除了研究zui毒、zui新的病毒，也对历史上旧的、变种的病毒作深入的研究、建档，并找出治疗的方法。

　　实验室取名让．梅里厄，是为了纪念疫苗专家、因飞机事故不幸英年早逝的让，他的夫人和4个女儿将他的遗产慷慨地捐献出来，为筹建 P4实验室奠定了资金基础。面积仅为600平方米的实验室造价达4000万法郎（2.4亿人民币），其中的仪器设备价值1000万法郎，每年的运行维持和实验费用是190万欧元。

　　里昂的 P4实验室全部用由玻璃和钢材建成，被一致公认为“新一代 P4的*”。其主楼分为三层：上层是空气处理区，保证实验室人员和动物的呼吸用气及实验室空气的消毒；下层是废物处理区，对实验室器材和实验垃圾进行消毒；中层为真正的 P4区。方形主楼的旁边，还有一个两层的、半圆柱形的、金属附属楼，负责进行实验准备，控制实验室的安全，全部由计算机实行中央控制。 P4区主要有两个面积为60至70平方米、相互独立的实验室和一个动物试验室，设计原则是将它们置于“盒子中的盒子”。研究人员进出入实验工作台，必须经过这样的程序：用通行卡和个人密码打开实验区的*道门，进入房间脱衣、进行清洁淋浴、穿上类似潜水员的密封服；进入另一室检查服装的密封性；再开一道门，即可进入动物实验室；此后，还有两道门将存放病菌的恒温箱和实验厅分开。需要说明的是，在进入动物实验室之前的每一个房间都是逐步减压的，房间的门上都安装充气密封垫，以防止病菌往外扩散。

　　生物安全非同小可

　　世界卫生组织（ WHO）一直非常重视生物实验室安全问题，早在1983年就出版了《实验室生物安全手册》，将传染性微生物根据其致病能力和传染的程度等划分为四类；将生物实验室根据其设备和技术条件等划分为四级；其相应的操作程序也划分为四级，并对四类微生物可操作的相应级别的实验室及程序进行了规定。2003年4月《实验室生物安全手册》（第三版）以电子版的形式在 WHO网页上问世。

　　我国在生物安全方面也制定过一些相应的条例和法规。中华人民共和国卫生行业标准（ WS233－2002）《微生物生物医学实验室生物安全通用准则》中对生物安全三级（ P3）实验室进行了规定。

　　P4实验室是一柄“双ren剑”，它的应用可能造福人类，但弄不好也可能为人类带来种种“祸害”。近年来，国际社会普遍认为生物武器的潜在威胁已大大增加。

　　P4实验室管理上的疏漏和意外事故，不仅可以导致实验室工作人员的感染，也可造成环境污染和大面积人群感染。国内外实验室意外感染的事故并不少见，严重者不得不宰杀成千上万只实验动物，甚至导致实验室工作人员死亡。管理愈不规范，防护条件愈差，发生意外事故的可能性就愈大。因而，通过防范和控制生物危害，藉以维护国家社会、经济及人民健康、生态环境安全，是生物安全的根本任务。

美国疾病控制中心实验室生物安全级别标准
本标准概括了传染性微生物和实验动物工作中的四个生物安全级别所包括的主要要素。
根据给个人、环境、社会提供的保护情况，确定级别。
生物安全一级(BSL-1)
BSL-1适合于非常熟悉的病源，该病源不会经常引发健康成人疾病，对实验人员和环境潜
在小。实验室没有必要和建筑物中的一般行走区分开。一般按照标准的微生物操作
，在开放的实验台面上开展工作。不要求、一般也不使用特殊的遏制设备和设施。实验
人员在实验程序方面受过特殊训练，由受过微生物学或相关科学一般训练的科学工作者
监督实验。
以下标准及特殊操作、安全设备及设施和BSL-1病源有关：
一、标准微生物操作：
1、在进行有关培养物及样品实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。
2、进行活体处理后，实验人员要洗手；离开实验室前脱手套。
3、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。不允许在工作区存放食物和日常
生活用品。在实验室中，戴隐型眼镜的人，也需戴口罩或面罩。食物应存放在工作区域
以外专用橱柜或冰箱中。
4、不能用嘴移液，只能用机械装置移液。
5、制定锐器安全使用规范。
6、所有的操作过程应尽量细心，避免产生溅出和气溶胶。
7、至少一天一次、活体溅出时，都应进行台面消毒。
8、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，均应使用可行的消毒方法进行消
毒，如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实
验室，其包装应符合有关地方、州、联邦法规。
9、当存在传染源时，应在实验室入口处贴生物标志，并显示以下信息：实验中的病
源名称、研究者姓名及。
10、实施控制昆虫和龋齿动物的程序(参见附录G)(另发)
二、特殊操作：无
三、安全设备(*道屏障)
1、和BSL-1相关的病源，其操作一般不需要生物安全柜之类的特殊遏制装置或设备。
2、建议穿实验服、大褂、制服，避免污染和衣服上的尘土。
3、若手上皮肤有伤或出皮疹，应戴手套。
4、操作过程中，估计会出现微生物或物溅出时，应戴保护眼具。
四、实验室设施(第二道屏障)
1、实验室应设置门以控制进入。
2、每个实验室有一个洗手池。
3、实验室设计要便于清洗，实验室内不适宜用地毯。
4、实验台表面应能防水、耐热、耐有机溶剂、耐酸碱和耐用于工作台面及设施消毒的其
他化学物质。
5、实验室的实验台应能承受预期的重量并符合使用。实验台、安全柜以及设备之间的空
间应便于打扫。
6、如果实验室有对着外面的窗子，应装防止苍蝇的窗纱。
生物安全二级(BSL-2)
BSL-2与BSL-1类似，适合于对人和环境有中度潜在的病源，与BSL-1的区别在于：(1
)实验人员均接受过病源处理方面的特殊培训，并由有资格的科学工作者指导；(2)进行
实验时，限制进入实验室；(3)对于污染的锐器，要特别注意；(4)某些可能产生传染性
气溶胶或飞溅物的过程。应在生物安全柜中或其它物理遏制设备中进行。
以下的标准及特殊操作、安全设备及设施和BSL-2病源有关：
一、标准微生物操作：
1、实验时，未经实验室主任同意，限制或禁止进入实验室。
2、进行活体处理后，实验人员要洗手；离开实验脱手套。
3、不许在工作区域饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。食物应存放在工作区域以外专用
橱柜或冰箱中。
4、不能用嘴移液，只能用机械装置移液。
5、制定锐器安全使用规范。
6、所有的操作过程应尽量细心，避免产生溅出和气溶胶。
7、实验完毕、下班前、活体溅出或溢出时，都应使用对病源有效的消毒剂进行台面消毒
。
8、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，均应使用可行的消毒方法进行消
毒，如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实
验室。离开该系统进行消毒的物料，在转移前应包装，其包装应符合有关地方、州、联
邦法规。
9、实施控制昆虫和龋齿动物的程序(参见附录G)(另发)
二、特殊操作：
1、在开展有关传染病源工作时，实验室主任应禁止或限制人员进入实验室。一般情况下
，易感人员或感染后会出现严重后果的人员，不允许进入实验室或动物房，例如，患有
免疫缺陷或免疫抑制的人，其被感染的性增加。实验室主任对每种情况的估计和决
定谁能进入实验室或动物房工作，负有zui终责任。
2、实验室主任应制定规章和程序，只有告知潜在风险并符合进入实验室特殊要求(如，
经过免疫接种)的人，才能进入实验室。
3、存在外源性病源时，实验室入口处应贴有生物标志，并显示以下信息：有关病源
、生物安全级别、免疫接种要求、研究人员姓名、、在实验室中必须佩带的个
人防护设施、出实验室所要求的程序。
4、实验室人员接受适当的、和实验室中处理或将要处理的病源有关的免疫接种或测试(
如，乙肝免疫接种或TB皮试)。
5、根据所处理的病源，适当时，收集和储存适合于实验室人员和有风险人员使用的基本
血清样品。根据所处理病源或设施的功能，应定期收集其他血清样品。
6、实验室主任为实验室人员特别制定的标准操作程序或生物安全手册中，应包括生物安
全程序。对于有特殊风险的人员，要求阅读并在工作及程序上遵照执行。
7、实验室主任保证实验及其辅助人员接受适当的培训，包括和工作有关的可能存在的风
险、防止暴露的必要措施和暴露评估程序。当程序必需改变时，有关人员必须每年更新
知识，接受附加培训。
8、对于污染的锐器，必须时刻保持高度的警惕，包括针、注射器、玻片、加样器、毛细
管、手术刀。
a．针和注射器或其他锐器应限制在实验室内，类似灌肠、静脉切开放血、或实验动物液
体吸出等，可以用其他器具的，就不要用锐器。可能时，用塑料器具代替玻璃器具。
b.注射和吸取感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次
性注射器(即注射器和针头是一体的)。用过的一次性针头必须弯曲、切断、破碎、重新
套上针头套、从一次性注射器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不
会被刺穿的、用于收集废弃锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中，转移
至处理区消毒，zui好高压杀菌。
c．适当时，使用带针头套的注射器、无针头的系统和其他安全设施。
d．打碎的玻璃器皿不能直接用手处理，必须用其它工具处理，如刷子和簸箕、夹子或镊
子。盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在到掉前，应按照地方、州、联邦的规定进行
消毒。
9．培养物、组织，体液标本，或具有潜在传染性的废物要放入带盖的容器中，以防在收
集、处理、储存、运输或装卸过程中泄露。
10．按日常程序、在有关传染源的工作结束后、尤其是传染源溅出或洒出后、或受到其
他传染源污染后，实验室设备和工作台面应当使用有效的消毒剂消毒。污染的设备在送
去修理、维护前，要按照地方、州或联邦的规定消毒；在离开设施转移前，要按照地方
、州或联邦的规定打包运输。
11．溅出或偶然事件中，明显暴露于传染源时，要立即向实验室主任报告。进行适当的
医学评估、观察、治疗，保留书面记录。12．和实验无关的动物不允许进入实验室。
三、安全设备(*道屏障)
1、任何时候都要使用正确保养的生物安全柜、zui好是二级生物安全柜、或其他合适的人
员防护设施、或物理遏制装置。
a．确定可能形成传染性气溶胶或溅出物的实验过程，包括离心、研磨、匀浆、剧烈震荡
或混匀、超声波破裂、开启装有传染源的容器(容器内部的压力可能与大气压不一致)、
动物鼻孔接种、从动物或胚胎卵采集感染组织。
b．涉及高浓度或大体积的传染源时，若选用密封转头或带安全罩的离心机，若转头或安
全罩仅在生物安全柜中打开，则可在开放实验室内离心。
2、当必须在生物安全柜外处理微生物时，需采取面部保护措施(跟镜、口罩、面罩、或
其他防溅装置)，以免传染源或其他有害物溅或洒到面上。
3、在实验室内，必须使用专用的防护性外衣、大褂、罩衫或制服。人员到非实验室区域
(如，咖啡屋、图书馆、门房)时，防护服必须留在实验室内。防护服可以在实验室内处
理，也可以在洗衣房中洗涤，但不能带回家中。
4、可能接触潜在传染源、被污染的表面或设备时，要戴手套。戴两副手套更合适。明显
污染的手套要处理，当有关传染源工作结束时或手套损伤时，要去掉手套。一次性手套
不用清洗、不能重复使用，不能用于接触"洁净"的表面(键盘、等)，也不应当戴着
到实验室外。要备有带滑石粉的乳胶手套。脱掉手套后，要洗手。
四、实验室设施(第二道屏障)
1、遏制病源的设施应该有带锁的门(见42CFR 72．6)(另发)。
2、新建实验室选址要远离公共场所。
3、每个实验室有一个洗手池。
4、实验室设计要便于清洗，实验室内不适宜用地毯。
5、实验台表面应能防水、耐热、耐有机溶剂、耐酸碱和耐用于工作台面及设施消毒的其
他化学物质。
6、实验室的操作台应能承受预期的重量并符合使用要求。实验台、安全柜以及设备之间
的空间应便于打扫。实验室使用的椅子及其它器具，应覆盖易于清洗的非织物。
7、安装生物安全柜时，要考虑到房间的通风和排风，不会导致生物安全柜超出正常参数
运行。生物安全柜应远离门、远离能打开的窗，远离行走区，远离其他可能引起风压混
乱的设备，保证生物安全柜气流参数在有效范围内。
8、应有眼睛冲洗装置。
9、光线适宜于开展所有的工作，避免反光和闪光，以免妨碍视觉。
10、没有特别的通风要求。添置新设备时，应考虑机械通风系统输送的气流不会造成实
验室外部空气的循环。如果实验室有对着外面的窗子，应装防止苍蝇的窗纱。
生物安全三级(BSL-3)
BSL-3应用于临床、诊断、教学、研究、或者生产设施，在该级别中开展有关内源性和外
源性病源的工作，若因暴露而吸入该病源。会引发严重的、可能致死的疾病。实验人员
应在处理致病性的和可能使人致死的病源方面受过专业训练，并由对该病源工作有经验
的、有资格的科学工作者监督。
所有与传染源操作有关的步骤，都在生物安全柜或其他物理遏制装置中进行，或由穿戴
合适防护服及设施的实验人员进行。实验室经过特殊设计和施工。
然而，应该认识到现有有些设施，不一定满足BSL-3的所有要求(即，双门进入工作区和
密封问题)。在这种情况下，在BSL-2设施中开展常规操作(如，诊断程序中用于鉴定；分
型、敏感性测试的病源繁殖)，其安全级别也可接受，但还需做到1)将实验室内废气排出
室外；2)实验室的通风经过平衡以向室内提供定向气流；3)工作时，禁止进入实验室；4
)严格遵照或使用BSL-3中推荐的标准微生物操作、特殊操作和安全设备。只有实验室主
任可作出对BSL-3推荐的修订方法进行补充的决定。
以下的标准和特殊安全操作、设备及设施和BSL-3病源有关：
一、标准微生物操作
1、实验时，由实验室主任决定限制或禁止进入实验室。
2、接触传染源的人员在离开实验室取下手套后，要洗手。
3、实验室内严禁饮食、吸烟、清洗隐型眼镜和化妆。实验室内戴隐型眼镜的人，也要戴
眼镜和面罩。食品要存放在工作区外专用的橱柜和冰箱中。
4、不能用嘴移液，只能用机械装置移液。
5、制定锐器安全使用规范。
6、所有的操作过程应尽量细心，避免产生气溶胶。
7、至少每天一次、或有活体洒出时，对工作台面进行消毒。
8、所有的培养物、储存物及其它规定的废物在释放前，均应使用可行的消毒方法进行消
毒，如高压灭菌。转移到就近实验室消毒的物料应置于耐用、防漏容器内，密封运出实
验室。来自BSL-3实验室的传染性废物转移至他处释放前应消毒。
9、实施控制昆虫和龋齿动物的程序(参见附录G)(另发)。
二、特殊操作
1、实验时，关闭实验室的门。
2、实验室主任对进入实验室进行控制，限制项目有关人员及辅助人员进入。一般情况下
，易感人员或感染后会出现严重后果的人员，不允许进入实验室或动物房，例如，患有
免疫缺陷或免疫抑制的人，其被感染的性增加。实验室主任对每种情况的估计和决
定谁能进入实验室或动物房工作，负有zui终责任。未成年人不得进入实验室。
3、实验室主任应制定规章和程序，只有告知潜在风险并符合进入实验室特殊要求(如，
经过免疫接种)、遵守进出程序的人，才能进入实验室和动物房。
4、当实验室或遏制设施中有传染源和感染动物时，所有实验室和动物房入口处，应贴有
警告标志和常用的生物符号，并显示以下信息：有关病源、实验室主任和有关
责任人的姓名和表、进入实验室的特别要求(如，必须免疫、戴口罩、或采取其他的
个人防护措施)。
5、实验室人员接受适当的、和实验室中处理或将要处理的病源有关的免疫接种或测试(
如，乙肝免疫接种或TB皮试)，并建议根据所处理的病源定期进行皮试。
6、适当时，收集和储存适合于所有实验室人员和其他有风险人员使用的基本血清样品。
根据所处理病源或实验室的功能，应定期收集其他血清样品。
7、实验室主任应制定实验室专用生物安全手册，标准操作程序中要包括生物安全预防措
施。要告知实验人员特殊风险，实验人员要阅读，并在操作和程序中遵照执行。
8、实验人员及其辅助人员应接受适当的培训，包括和工作有关的可能存在的风险、防止
暴露的必要措施和暴露评估程序。当程序必需改变时，有关人员必须每年更新知识，接
受附加培训。
9、实验室主任有责任确保在涉及BSL-3的微生物工作开展之前，所有人员熟练掌握标准
微生物操作及技能，熟练掌握特殊实验室设施的操作和运行，其中可能包括人致病菌或
细胞培养物处理的重要技术，或由实验室主任或其他熟悉于微生物安全操作及技能的、
称职的科研工作者提供的特殊培训课程。
10、必须经常对所有污染的锐器采取高度预防措施，包括针头和注射器、玻片、移液管
、毛细管和手术刀。
a．针和注射器或其他锐器应限制在实验室内，类似灌肠、静
脉切开放血、或实验动物液体吸出等，可以用其他器具的，就不要用锐器。可能时，用
塑料器具代替玻璃器具。
b．注射和吸取感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次性注射器(即注射器和针头
是一体的)。用过的一次性针头必须弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射
器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不会被刺穿的、用于收集废弃
锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中，转移至处理区消毒，zui好高压杀
菌。
c．适当时，使用带针头套的注射器、无针头的系统和其他安全设施。
d．打碎的玻璃器皿不能直接用手处理，必须用其它工具处理，如刷子和簸箕、夹子或镊
子。盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在到掉前，应按照地方、州、联邦的规定进行
消毒。
11、所有与传染源有关的开放操作，都应在遏制设施内的生物安全柜或其他物理遏制设
备中进行。不许在开放的实验台上、并在开放的设施中开展工作。用背面为塑料质地的
纸擦拭生物安全柜内的无孔台面，便于清洁。
12、按日常程序、在有关传染源的工作结束后、尤其是传染源洒出或溅出后、或受到其
他传染源污染后，实验室设备和工作台面应当使用有效的消毒剂消毒。
a．洒出的传染源需由专业人员、或由经过适当培训且配有装备的处理高浓度传染源的人
员进行消毒、处理、清洗。制定并公布可能造成溅洒的实验程序。
b．污染的设备，在离开设施送去修理、维护或打包运输前，要按照地方、州或联邦的规
定消毒。
13、培养物、组织，体液标本，或具有潜在传染性的废物要放入容器中，以防在收集、
处理、储存、运输或装卸过程中泄露。
14、实验室里所有可能被污染的废弃物品(如：手套、实验室外套等)，在丢弃或重新使
用之前，必须经过消毒。15、洒漏或偶然事件中，明显或可能暴露于传染源时，要立即
向实验室主任报告。进行适当的医学评估、观察、治疗，保留书面记录。
三、安全设备(*道屏障)
l、进入实验室时，要穿上实验防护服，如，前襟一体或后系式大褂、干净的外套或连裤
服。不得在实验室外穿防护服。重复使用的衣服在清洗前要消毒，衣服被明显污染后应
更换。
2、在处理传染源、感染动物及被污染的仪器时，必须戴手套。
3、建议经常更换手套和洗手，一次性手套不能重复使用。
4、有关传染源的所有操作、感染动物的验尸、从感染动物或胚胎卵采集组织或液体等，
都应在II级或III级生物安全柜中进行(见附4)(另发)。
5、当操作不能在生物安全柜中进行时，应适当的综合使用个人防护设施(如，口罩，面
罩等)和物理遏制设施(如：带安全罩或密封转头的离心机)。
6、当进入内有感染动物的房间时，应采取呼吸和面部保护措施。
四、实验室设施(第二道屏障)
1、实验室要离开建筑物内的行走区，禁止随便进入实验室。进入走道后，至少需要经过
两道自动门，才能进入实验室。所有的门都应有锁(见附录F)(另发)。过道里可以设计一
个更衣室。
2、每个实验室有一个洗手池，洗手池的操作应该是免接触式或全自动的，洗手池应安装
在门口附近。
3、处理BSL-3病源的区域，墙面、地面、天花板应易于清洗、消毒；若有接缝，应密封
；表面应光滑防水；对实验室常用化学试剂和消毒剂具有耐腐蚀性。地板应整体、防滑
，建议在地板凹处使用掩蔽罩。墙面、地面、天花板都不应留有缝隙，或在设施消毒时
能够密封。
4、实验台表面应能防水、耐热、耐有机溶剂、耐酸碱和用于工作台面及设施消毒的其他
化学物质。
5、实验室的操作台应能承受预期的重量。实验台、安全柜以及设备间的空间便于打扫。
实验室使用的椅子及其它器具，应覆盖易于清洗的非织物。
6、所有的窗门必须关闭和密封。
7、有实验垃圾处理设施及其使用方法，该设施zui好设在实验室内(即，高压锅、化学消
毒剂、焚烧炉、其他可行的消毒方法)。应有消毒设备使用方法。若垃圾运出实验室，应
适当密封，并不应通过公共通道运送。
8、应配置生物安全柜，安全柜放置地点应远离门、房间通风百叶窗、实验室内行走区。
9、应有管道化的排气系统，该系统进入实验室的风向应从"洁净区"到"污染区"。排出的
空气不再循环至建筑物内的任何其他区域。排出的空气不需要过滤或作其他处理，但也
要依所处场所的要求、特殊病源操作、使用条件而定。外部排气口要远离有人区、进风
口，否则需经过HEPA过滤。实验人员必须证实进入实验室的风向是正确的。建议在实验
室的入口处设置可视的监视装置，表明和证实进风的风向。要考虑安装HVAC控制系统。
防止实验室持续正向增压。应安装声音报警装置，警告实验人员HVAC系统出了问题。
10、若生物安全柜至少每年经过测试和确证，则二级生物安全柜排出的、经过HEPA过滤
的空气，可进入实验室循环。当二级生物安全柜通过建筑物排气系统排出空气时，安全
柜的排气管路的连结，应避免对安全柜的空气平衡或建筑物排气系统的空气平衡产生干
扰(如，在安全柜排气管和排气管道间形成空气隙)。当使用三级生物安全柜时，要和排
气系统直接连结。若三级安全柜和供气系统相连，应避免安全柜正向增压(见附A)。
11、会产生气溶胶的连续流离心机及其他设备应在一个装置中，该装置通过HEPA过滤器
排出空气，而避免直接排入实验室中。至少每年测试HEPA系统。另外，当远离有人区或
进风口时，该设备排出的空气可以排到外面。
12、真空管路由液体消毒剂汽水阀和HEPA过滤器及类似设备保护。需要时，要更换过滤
器。另外，可以使用手提真空泵(也需要由汽水阀和过滤器正确保护)。
13、实验室内应有眼睛冲洗装置。
14、光线适宜于开展所有的工作，避免反光和闪光，以免妨碍视觉。
15、BSL-3设施的设计和操作程序必须文件化。设施必须经过测试以确证设计和操作参数
在系统运转前已达到要求。因操作经验，会修改操作程序，所以设施必须反复测试，每
年至少一次。
16、若有关病源陈述(根据风险分析、场所条件、其他有关联邦/州／地方法规而定)中要
求，则应采取其他环境保护措施(如，实验人员淋浴、排出空气的HEPA过滤、其他管道设
施的遏制处理、液体消毒剂的供应)。
生物安全四级(BSL-4)
有些的外源性病源，具备因气溶胶传播而致实验室感染和导致生命疾病的高度
个体风险，有关工作应在BSL-4实验室中开展。和BSL-4病源有相近或特定抗原关系的病
源，也应在该级别中开展工作，在该级别的连续工作和低级别的工作中得到足够数据的
病源除外。实验室成员应在处理特别的传染源方面受过特殊和全面的训练，应了解
标准和特殊操作中一级和二级遏制的作用、遏制设备、实验室设计性能。实验由在有关
病源方面受过训练、并有工作经验的、有资格的科学工作者监督。实验室主任严格控制
进入实验室。设施应在独立的建筑物内；或在建筑物的一个控制区内，但和建筑物内的
其他区域完全隔离。应制定、实施特殊设施操作手册。
在设施的工作区内，所有工作应限制在三级生物安全柜中；或在二级生物安全柜中，但
得使用装备生命支持系统的一体正压防护服。BSL-4实验室经过特殊设计，是一个特殊的
工程，可以防止微生物向环境中扩散。
以下的标准和特殊安全操作、设备及设施和BSL-4病源有关。
一、标准微生物操作
1、实验时，由实验室主任决定限制进入实验室。
2、要制定锐器的安全使用规范。
3、所有的操作过程应尽量细心，避免产生气溶胶。
4、至少每天一次、或有活体洒出时，对工作台面进行消毒。
5、所有废物在释放前，应使用可行的方法消毒，如高压灭菌。
6、实施控制昆虫和龋齿动物的程序(参见附录G)(另发)。
二、特殊操作
l、只有在实验过程中或辅助需要而必须进入设施或独立实验室的实验人员，才能授权进
入。患有免疫缺陷或免疫抑制的人，存在被感染的。另外，对于感染风险大的人、
因感染而会致特殊的人，如儿童或孕妇，不准进入实验室或动物房。
监督者对每种情况的估计和决定谁能进入实验室工作负有zui终责任。通过安全措施(如锁
上门)限制进入实验室。实验室主任、风险控制负责人、设施物理安全负责人控制人员进
入。进入前，要告知潜在，通知采取适当安全防护以保证安全。授权进入者要执行
通知规定，执行现行所有其他进出程序。所有人要作工作日志，记录每次进出日期、时
间。应建立实用有效的紧急情况处理程序。
2、当实验室或动物房中有传染源和感染动物时，所有入口处的门上应贴有警告标志
和常用的生物符号，并标明以下信息：有关病源、实验室主任和其他责任人的姓名
表、并表明进入该区的所有特别要求(如，必须免疫或戴口罩)。
3、实验室主任有责任确保在涉及BSL-4的微生物工作开展之前，所有人员非常熟练掌握
标准微生物操作及技能，熟练掌握特定实验室设施的特殊操作和运行，其中可能包括人
致病菌或细胞培养物处理的重要经验，或由实验室主任或其他熟悉于独特的微生物安全
操作及技能的、有资格的科研工作者提供的特殊培训课程。
4、实验室人员接受有效的、和实验室中处理或将要处理的病源有关的免疫接种。
5、适当时，收集和储存适合于所有实验室人员和其他有风险人员使用的基本血清样品。
根据所处理病源或实验室的功能，应定期收集其他血清样品。决定建立血清学监督程序
时，应当考虑能否得到有关病源的抗体测试方法；程序中，收集一段时间后，应进行血
清样品的测试，并将测试结果通知参与者。
6、实验室主任应制定、使用生物安全手册。要告诉实验人员特殊风险，实验人员要阅读
，并在操作和程序中遵照执行。
7、实验人员及其辅助人员应接受适当的培训，包括和工作有关的可能存在的风险、防止
暴露的必要措施和暴露评估程序。当程序必需改变时，有关人员必须每年更新知识，接
受附加培训。
8、人员只有通过更衣间和淋浴室进出实验室。每次离开实验室时，淋浴消毒。仅在紧急
情况下，使用气塞进出实验室。
9、在外更衣间脱掉并保存日常衣服。所有进入实验室的人员，应有并使用整套实验服，
包括内衣、紧身长衬裤和衬衫或连衣裤工作服、鞋子、手套。当离开实验室并进入淋浴
区前，在内更衣间脱掉实验服。衣服清洗前高压杀菌。
10、设施中所需用品和物料通过双门高压锅、烟熏消毒舱、或气塞送入。每次使用后，
要对这些装置适当消毒。双门高压锅、烟熏消毒舱、或气塞外面的门牢固的关上后，设
施内的人员打开里侧的门取出物料。物料送入设施后，门上保险。
11、必须经常对所有污染的锐器采取高度预防措施，包括针头和注射器、玻片、移液管
、毛细管和手术刀。
a．针和注射器或其他锐器应限制在实验室内，类似灌肠、静脉切开放血、或实验动物液
体吸出等，可以用其他器具的，就不要用锐器。可能时，用塑料器具代替玻璃器具。
b．注射和吸取感染材料时，只能使用针头固定注射器或一次性注射器(即注射器和针头
是一体的)。用过的一次性针头必须弯曲、切断、破碎、重新套上针头套、从一次性注射
器上去掉，或在丢弃前进行人工处理，要不将之小心放入不会被刺穿的、用于收集废弃
锐器的容器中。非一次性锐器必须放置在坚壁容器中，转移至处理区消毒，zui好高压杀
菌。
c．适当时，使用带针头套的注射器、无针头的系统和其他安全设施。
d．打碎的玻璃器皿不能直接用手处理，必须用其它工具处理，如刷子和簸箕、夹子或镊
子。盛污染的针头、锐器、碎玻璃的容器在到掉前，应按照地方、州、联邦的规定进行
消毒。
12、从三级生物安全柜和BSL-4实验室转移的活的或完整的生物材料应转入不易破碎的、
密封的*级容器中，然后由不易破碎的、密封的第二级容器包裹。通过专用的杀菌浸
泡罐、烟熏消毒舱、或气塞转移出设施。
13、除了需要保持活性或完整状态的生物材料外，除非在离开实验室前高压杀菌或消毒
，任何材料不得转移出BSL-4实验室。可能被高温或蒸汽毁坏的设备和材料，可通过气体
或烟雾的方法在专用气塞或舱中消毒。
14、在有关传染源的工作结束后、尤其是传染源洒出或溅出后、或受到其他传染源污染
后，实验室设备应当进行日常消毒。设备送去维修或保养前应消毒。
15、洒出的传染源需由适当的专业人员、或由经过适当培训且配有装备的处理高浓度传
染源的人员进行处理、清洗。在实验室内，制定并公布可能造成溅洒的实验程序。
16、建立一个体系，报告实验事故、暴露、员工长期旷工以及潜在的和实验室相关的疾
病的医疗监督。做好并保存书面记录。和报告-监督体系关系重大的是，得到检疫、隔离
、和对潜在或已知患实验室相关疾病的人员进行治疗的设施。
17、和所进行的实验工作无关的材料(如，植物、动物和衣服)不允许带入设施。
三、安全设备(*道屏障)
设施内的所有程序都在三级生物安全柜中进行，或者穿装备生命支持系统的一体的正压
个人防护服、在二级生物安全柜中进行。
四、实验室设施(第二道屏障)
BSL-4实验室有两种模型：生物安全柜实验室，所有的病源处理均在三级生物安全柜中进
行；防护服实验室，实验人员穿防护服。也可以在同一设施中，两种模型结合。若结合
使用，每种模型必须符合该模型的所有要求。
(一)生物安全柜实验室(见附1)
1、BSL-4实验室为独立的建筑物或建筑物内有明确界线的独立区。设施内的房间作如下
安排，至少通过两道门后，才进入有三级生物安全柜的房间(生物安全柜室)。供进出生
物安全柜室用的外内更衣间通过淋浴室隔开。不能通过更衣间进入生物安全柜室的材料
、用品、设备，可通过设有双门高压锅、浸泡缸、烟熏消毒舱、或通气间的遏制屏障处(
用于消毒)进入。
2、实验开始前，每天检查所有的控制参数(如，气流方向)和生命支持系统，保证实验室
按照其运转参数运转。
3、生物安全柜室和内更衣间的墙面、地面、天花板建成密封的内壳,以便于烟熏、防止
动物和昆虫进出。地板整体密封、覆盖。内壳的内表面耐液体和化学试剂，便于该区域
清洁和消毒。有关结构和表面的所有裂缝均密封。进入生物安全柜室和内更衣间的门框
尽量小、能密封，便于消毒。生物安全柜室地板上的任何排水管直接通入废液消毒系统
中。下水道开口和其他管道含有HEPA过滤器，防止动物。
4、实验台表面一体或密封，防水、耐热、耐有机溶剂、耐酸碱和用于工作台面及设施消
毒的其他化学物质。
5、实验室的操作台开口结构简单，能承受预期的重量并符合使用要求。实验台、安全柜
以及设备之间的空间应便于打扫、消毒。实验室使用的椅子及其它器具，应覆盖易于消
毒的非织物。
6、有免接触式或全自动操作的洗手池，洗手池应安装在生物安全柜室和外内更衣间的门
附近。
7、若有中央真空系统，生物安全柜室外的区域不需要抽真空。在线的HEPA过滤器应安装
在离使用点和供应阀尽可能近的地方。过滤器的安装要便于就地消毒和更换。生物安全
柜室的其他液体和气体供应系统，应有防回流装置保护。
8、若有喷水池，应设在实验室外的走道里，自动或脚动操作。喷水池的供水系统和实验
室区域的供水系统分开，设防回流保护器。
9、进入实验室的门可自动关闭，并且可锁。
10、任何窗户不会打破，并密封。
11、对于传递出三级生物安全柜和生物安全柜室的需要消毒的物料，备有双门高压锅。
向遏制屏障外开口的高压锅必须密封在遏制屏障的墙上。高压锅门自动控制，使得向外
的门只有在高压灭菌过程完成后，才能打开。
12、具备通过浸泡缸、烟熏消毒舱消毒、或类似的消毒手段，使得不能在高压锅中消毒
的物料和设备，能安全地从三级生物安全柜和生物安全柜室中转出。
13、污染的内更衣间(包括厕所)和生物安全柜室中的洗手池、地面排水管(若使用)、高
压舱、其他来源的液流，通过可行的方法消毒(zui好是热处理)后，才能排入污水管中。
来自淋浴室、无污染厕所的液流，可不经过处理而排入污水管中。用于废液消毒的程序
，必须在物理上和生物上均有效。
14、设有明确的非循环的通风系统，平衡系统的供风和排风装置，保证气流方向从小危
险区到潜在的大区。能对相邻区之间各自的气压／气流方向监视并报警，以指明系
统故障。在无污染的更衣间入口处设有适当的气压可视监视装置，表明、证实各生物安
全柜室的气压。监视供气和排气装置气流，HVAC控制系统可避免实验室持续正向增压。
三级生物安全柜应直接接入排气系统。若三级安全柜和供气系统相连，应避免安全柜正
向增压。
15、生物安全柜室、内更衣间、通气间的供气和排气通过HEPA过滤器。在空气入口处进
气，从所用空间排气。HEPA过滤器离供应源应尽可能近，以减少可能污染的管道长度。
所有HEPA过滤器需要每年测试和确证。HEPA过滤器装置，应适于过滤器取下前就地消毒
，或可将过滤器转入密封、不漏气的一级容器中，然后消毒和／或焚毁。HEPA过滤器装
置的设计应适于过滤器的安装、起作用。使用预先确证的HEPA过滤器是有利的。排气HEP
A过滤器的使用寿命，可以因对供气适当预过滤而延长。
16、BSL-4设施的设计和操作程序必须文件化。设施必须经过测试以确证设计和操作参数
在系统运转前已达到要求。因操作经验，会修改操作程序，所以设施必须每年确证。
17、实验室和外部应有适当的通讯系统(如，传声器、传真、计算机)。
(二)、防护服实验室
1、BSL-4实验室为独立的建筑物或建筑物内有明确界线的独立区。设施内的房间作如下
安排，通过更农区和消毒区，进入开展有关BSL-4病源工作的房间(防护服实验室)。供进
出防护服实验室用的外内更衣间通过淋浴室隔开。在设施内保持一个特殊设计的防护服
区，为实验人员提供类似于三级生物安全柜的保护。进入该区的人员，穿一体正压防护
服，防护服装备生命支持系统，通过HEPA过滤供应空气。生命支持系统包括充足的呼吸
空气压缩罐、报警器、紧急备用呼吸空气罐。通过装于空气密封门上的气塞进入该区。
工作人员离开该区前，用消毒剂淋浴对防护服表面消毒。可自动启动应急供电，至少保
证排气系统、生命支持系统、报警、灯光、进出控制、和生物安全柜运转。对于周围实
验室；防护服内的气压是正的。相对于相邻区域，防护服区内的气压是负的。备有应急
光源和通讯系统。防护服实验区、消毒剂淋浴区、气塞的内壳的所有缝隙都密封。
2、实验开始前，每天检查所有的控制参数(如，气流方向、
消毒剂淋浴)和生命支持系统，保证实验室按照其运转参数运转。
3、对于传递出防护服实验室的需要消毒的废料，可使用遏制屏障上的双门高压锅。向防
护服实验区外面开的高压锅门，必须密封在防护服实验区的外墙上，门自动控制，使得
外面的门只有在高压灭菌过程完成后，才能打开。配备用于消毒的浸泡缸、烟熏消毒舱
、或通气气塞，以传入不能通过更衣间进入防护服区的物料、用品、设备。这些装置也
可用于不能高压消毒的物料、用品、设备从实验室安全传出。
4、防护服区的墙面、地面、天花板建成密封的内壳，以便于烟熏、防止动物和昆虫(见
附G)。内壳的内表面耐液体和化学试剂，便于该区域清洁和消毒。有关结构及表面的所
有的裂缝均密封。防护服区地板上的排水管设有存水弯，内有对目标病源显效的化学消
毒剂，并和废液消毒系统直接相连。下水道开口和其他管道合有HEPA过滤器。
5、防护服区的内部设施配件，如灯固定器、通气管道、公用管道的安装，应尽量减少水
平表面积。
6、实验台表面；体，防水、耐热、耐有机溶剂、耐酸碱和用于工作台面及设备消毒的化
学物质。
7、实验室的操作台开口结构简单，能承受预期的重量并符合使用要求。实验台、安全柜
以及设备之间的空间应便于清洁、消毒。实验室使用的椅子及其它器具，应覆盖易于消
毒的非织物。
8、防护服区设有免接触式或全自动操作的洗手池。应风险评估要求，外内更衣间应有洗
手池。
9、若有中央真空系统，防护服区外的区域不需要抽真空。在线的HEPA过滤器应安装在离
使用点和供应阀尽可能近的地方。过滤器的安装要便于就地消毒和更换。防护服区其他
液体和气体供应系统，应有防回流装置。
10、进入实验室的门可自动关闭，并且可锁。消毒剂淋浴室的内外门和气塞的内外门互
锁，防止两房间的门同时打开。
11、任何窗户不会打破，并密封。
12、洗手池、地面排水管(若使用)、高压舱、和遏制屏障内其他来源的液流，通过可行
的方法消毒(zui好是热处理)后，才能排入污水管中。来自淋浴室、厕所的液流，可不经
过处理而排入污水管中。用于废液消毒的程序，必须在物理上和生物上均有效。
13、设有明确的非循环的通风系统，平衡系统的供风和排风装置，保证气流方向从小危
险区到潜在的大区。建议有备用供气扇，要求有备用排气扇。能对相邻区之间各自
的气压／气流方向监视并报警，以指明系统故障。在无污染的更衣间入口处设有适当的
气压可视监视装置，表明、证实各防护服区的气压。监视供气和排气装置气流，HVAC控
制系统可以避免实验室持续正向增压。
14、防护服区、消毒淋浴间、消毒气塞的供气通过HEPA过滤器。来自防护服区、消毒淋
浴间、消毒气塞的普通房间排气，通过两个排列的HEPA过滤器处理，然后向外释放。在
空气入口处进气，从所用空间排气。HEPA过滤器离供应源应尽可能近，以减少可能污染
的管道长度。所有HEPA过滤器需要每年测试和确证。HEPA过滤器装置，应适于过滤器取
下前就地消毒，或可将过滤器转入密封、不漏气的一级容器中，然后消毒和／或焚毁。H
EPA过滤器装置的设计应适于过滤器的安装、起作用。使用预先确证的HEPA过滤器是有利
的。排气HEPA过滤器的使用寿命，可以因对供气适当预过滤而延长。
15、供气和排气点的布置，应当以减少防护服房间内通气空间死角为原则。
16、在穿正压防护服工作人员工作的设施内，经过处理的、来自二级生物安全柜的空气
，可以释放到房间中或通过设施的排气系统向外排放。若通过设施排气系统向外排放处
理后的空气，在和排气系统连接时，应考虑避免干扰生物安全柜或设施排气系统的空气
平衡。
17、BSL-4设施的设计和操作程序必须文件化。设施必须经过测试以确证设计和操作参数
在系统运转前已达到要求。因操作经验，会修改操作程序，所以设施必须每年确证。
18、实验室和外部应有适当的通讯系统。
生物安全实验室分级
美国国立卫生研究所 美国疾病管理中心 病源 操作 一级屏障 二级屏障
P1 BSL-1 不会经常引发健康成人疾病 标准的微生物操作 不要求 开放实验
台、洗手池
P2　　　　　　　　　　 BSL-2　　　　　　　　　　 人类病源菌，因皮肤伤口、
吸入、黏膜曝露而发生　　　　　　　 BSL-1操作加：1、限制进入2、有生物
警告标志3、"锐器"安全措施4、生物安全手册，其中规定废物消毒和医疗观察 1级、
2级生物安全柜　实验服、手套、若需要则采取面部保护措施 BSL-1加：高压灭菌锅
P3 BSL-3 内源性和外源性病源，可通过气溶胶传播，能导致严重后果或生命
BSL-2操作加：1、控制进入2、所有废物消毒3、洗涤前，实验服消毒4、有基础血清
1级、2级生物安全柜保护性实验服、手套、若需要则采取呼吸保护措施 BSL-2加：1、
和进入走廊隔开2、双门进入，门自动关闭3、排出的空气不循环4、实验室内负压
4 BSL-4 对生命有高度的性病源或外源性病源：致命、通过气溶胶而致实
验室感染：或未知传播风险的有关病源 BSL-3操作加：1、进入前换衣服2、出实验室前
淋浴3、带出设施的所有材料消毒 3级生物安全柜或1级、2级生物安全柜加全身、供应
空气、正压防护服 BSL-3加：1、单独建筑或隔离区域2、有供气系统、排气系统、真
空系统、消毒系统3、其他有关要求