紫外可见分光光度计主要技术指标及其检定方法

 紫外可见分光光度计可达到检测质量与成分的目的。在对不同的仪器进行分析时，紫外可见光光度计是常规的分析仪 器之一，原理就是紫外可见光度法。紫外可见光光度计有很多的特点：如，由于选择性好而且灵敏度较高，维护管理很 方便，所以在使用中更为常见；第二，它的结构较为简单，可以很方便地进行操作而且在成本上又不是非常贵。以光路设计 为基础，对紫外可见分光光度计进行分类，可以依据光路设计分为三种类型：单光束分光光度计、双光束分光光度计以及双 波长分光光度计。鉴于此，本文主要分析紫外可见分光光度计主要技术指标及其检定方法。 1.紫外-可见分光光度法工作原理以及相关应用 紫外可见分光光度法的工作原理就是利用不同物质的 分子在紫外可见光谱区上的辐射吸收的不同，利用分子的这 一特性来进行有效地区分辨别。紫外可见分光光度法在物质 的定性定量分析以及物质纯度分析物质结构分析等多种方 面都有着广泛的应用，起着不可或缺的作用。例如：此种检 测方法在食品行业中的运用，可以对食品的质量进行有效地 安全监测。而对于生活质量方面来说，食品卫生及质量是 为重要的一点，只有确保食品不会出现安全问题，才能够有 效地促进国民健康生活。现阶段，我国出现的食品安全问题 有以下几种：食品造假；在食品添加对人体有害的添加剂； 一些非法添加物的滥用；除了这些主要问题之外还存在食品 残留农（兽）药、微生物或者重金属等有害物质的情况，以 上情况都会造成食品出现质量安全问题，因此必须对食品进 行安全分析、检测，确保食品不会出现质量安全问题。 2.紫外可见分光光度计主要技术指标 2.1波长准确度及其检定方法 波长的实际测定值和理论值相减，就是紫外可见分光光 度计的波长的准确度。它在测试不同的仪器时，作用非常大， 是非常关键的技术指标。在我国，计量检定工作，波长准确 度是很重要的。检定紫外可见分光光度计的波长准确度有很 多的方式，下面将通过两种方法进行寿命说明：汞灯和氖灯 的利用。 汞灯 我国在对紫外分光光度计波长准确度进行检定时，很多 的生产厂一般都广泛利用汞灯进行测试。具体的操作流程就 是：将原光源拆下来，采用标准灯，对标准光源灯各条的特 征谱线进行测试，波长准确度就是测量值和理论值做差。自 利用汞灯进行测试的过程中，能量测量作为测量的方式，波 段的范围设置在245-560nm范围之内，空气作为样品的参考 系，光谱带的宽设置为2nm，再通过波长扫描。波长准确度 就是汞灯的各特征波长的测量值和其相应的理论值之差。为 了确保准确度，可以重复进行3次，波长准确度就选择3次 的平均值。 氖灯 在对紫外可见分光光度计的波长准确度进行检测时，通 常人们在选用标准灯时用氖灯。在仪器紫外区，由于氖灯的 连续光谱优势，就会在紫外区作为光源。在可见区，由于光 谱中波长为656. 1nm和为486. 0nm是很容易分离的，而且具 有高的强度，谱线特征非常明显，所以对仪器波长准确度进 行检定时可以利用谱线。在我国，对于仪器进行计量检定都 会用波长准确度较为高的标准灯-氖灯。 2.2波长重复性及其检定方法 多次测试波长之后数据符合程度，也就是多次测试波长 的数据离散性就是波长的重复性 (WavelengthRepeatability)。检定波长的重复性方法，操 作简单。种方法，测试波长的准确度之后，测试三次取 平均值，波长重复性就是通过和3次测试中小值或者大 值做的差；第二种，测试波长的准确度，要经过3次测试， 波长重复性就是大值与小值之差。 2.3光度准确度及其检定方法 光度的实际测定值和理论值之差就是光度准确度 (PhotoMtricAccuracy)。它俩之间的差越小，测量就会更 准确，光度的准确度就会更高。一般，表示紫外可见分光光 度计光度的准确度有以下两种方式：①透射比误差或者透射 比准确度（TransmittanceAccuracy)，表示用 TA (或AT); ②吸光度误差（AbsorbanceError)或者是吸光度准确度 (Absorbd-nceAccuracy)，在表示用 AA (或AA)时，要注 意测量时具体的吸光度情况。 3.紫外可见分光光度法的合理化运用 3.1溶液中物质含量的测定 应用紫外可见分光光度计测定标准溶液和未知液的吸 光度进而进行比较；也可先测出不同浓度标准液的吸光度， 绘制标准曲线，在一定浓度范围内标准曲线为直线，然后测 定出未知液吸光度，即可从标准曲线上查到其对应浓度。 3.2化合物的鉴定 用不同波长的单色光分别通过某一浓度溶液，测定每一 种单色光的吸光度，之后分别以波长和分光度作为横坐标和 纵坐标，绘制得到吸收光谱曲线。不同食品有其特定的吸收 光谱曲线，借此可以鉴定食品种类。紫外吸收光谱分析主要 用于已知物质定量分析，测定化合物中含有微量的具有紫外 吸收的杂质。 3.3反应动力学研宄 借助于分光光度法可得出特定化学反应速度常数，借此 从两个或两个以上温度条件下的速度数据得出反应活化能。 3.4络合物组成和稳定常数的测定 金属离子可与有机物形成络合物且在紫外可见区有吸 收，据此可利用分光光度法来研宄其组成。 结语：总之，紫外可见分光光度法是利用物质分子对紫 外可见光谱区的辐射的吸收来进行分析的一种仪器分析，这 种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子 能级间的跃迁。朗伯-比耳定律是光吸收的基本定律，是分 光光度法定量分析的依据和基础。紫外可见分光光度计在食 品检验中应用广泛，主要包括定量、定性和结构分析以及反 应动力学和溶液平衡研宄。