食品中总汞的测定方法
1 主题内容与适用范围
本标准规定了食品中总汞的测定方法。
本标准适用于食品中总汞的测定。
zui低检出浓度：*法冷原子吸收光谱法：(一)压力消解法为0.4μg/kg；(二)其他消解法为10μg/kg；第二法比色法为25μg/kg。
*篇 冷原子吸收光谱法(*法)
2 原理
汞蒸气对波长253.7nm的共振线具有强烈的吸收作用。样品经过酸消解或催化酸消解使汞转为离子状态，在强酸性介质中以氯化亚锡还原成元素汞，以氮气或干燥空气作为载体，将元素汞吹入汞测定仪，进行冷原子吸收测定，在一定浓度范围其吸收值与汞含量成正比，与标准系列比较定量。
(一) 压力消解法
3 试剂
分析过程中全部用水均使用去离子水(电阻率在8×105Ω以上)，所使用的化学试剂均为分析纯或优级纯。
3.1 硝酸。
3.2 盐酸。
3.3 过氧化氢(30%)。
3.4 硝酸(0.5＋99.5)：取0.5mL硝酸，慢慢加入50mL水中，然后加水稀释至100mL。
3.5 高锰酸钾溶液(50g/L)：称取5.0g高锰酸钾，置于100mL棕色瓶中，以水溶解稀释至100mL。
3.6 硝酸—重铬酸钾溶液(5＋0.05＋94.5)：称取0.05g重铬酸钾，溶于水中，加入5mL硝酸，用水稀释至100mL。
3.7 氯化亚锡溶液(100g/L)：称取10g氯化亚锡，溶于20mL盐酸中，以水稀释至100mL，临用时现配。
3.8 无水氯化钙。
3.9 汞标准储备液：准确称取0.1354g经干燥器干燥过的HgO2，溶于硝酸重铬酸钾溶液中，移入100mL容量瓶中，以硝酸—重铬酸钾溶液稀释至刻度。混匀。此溶液每毫升含1.0mg汞。
3.10 汞标准使用液：由1.0mg/mL汞标准储备液经硝酸—重铬酸钾溶液稀释成2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ng/mL的汞标准使用液。临用时现配。
4 仪器
所用玻璃仪器均需以硝酸(1＋5)浸泡过夜，用水反复冲洗，zui后用去离子水冲冼干净。
4.1 双光束测汞仪(附气体循环泵、气体干燥装置、汞蒸气发生装置及汞蒸气吸收瓶)。
4.2 恒温干燥箱。
4.3 压力消解器、压力消解罐或压力溶弹。
5 分析步骤
5.1 样品预处理
5.1.1 在采样和制备过程中，应注意不使样品污染。
5.1.2 粮食、豆类去杂质后，磨碎，过20目筛，储于塑料瓶中，保存备用。
5.1.3 蔬菜、水果、鱼类、肉类及蛋类等水分含量高的鲜样用食品加工机或匀浆机打成匀浆，储于塑料瓶中，保存备用。
5.2 样品消解(可根据实验室条件选用以下任何一种方法消解)
5.2.1 压力消解罐消解法：称取1.00～3.00g样品(干样、含脂肪
高的样品少于1.00g，鲜样少于3.00g或按压力消解罐使用说明书称取样品)于聚四氟乙烯内罐，加硝酸2～4mL浸泡过夜。再加过氧化氢(30%)2～3mL(总量不能超过罐容积的1/3)。盖好内盖，旋紧不锈钢外套，放入恒温干燥箱，120～140℃保持3～4h，在箱内自然冷却至室温，用滴管将消化液洗入或过滤入(视消化后样品的盐分而定)10.0mL容量瓶中，用水少量多次洗涤罐，洗液合并于容量瓶中并定容至刻度，混匀备用；同时作试剂空白。
5.3 测定
5.3.1 仪器条件：打开测汞仪，预热1～2h，并将仪器性能调至zui佳状态。
5.3.2 标准曲线绘制：吸取上面配制的汞标准使用液2.0，4.0，6.0，8.0，10.0ng/mL各5.0mL(相当于10.0，20.0，30.0，40.0，50.0ng汞)，置于测汞仪的汞蒸气发生器的还原瓶中，分别加入1.0mL还原剂氯化亚锡(100g/L)，迅速盖紧瓶塞，随后有气泡产生，从仪器读数显示的zui高点测得其吸收值，然后，打开吸收瓶上的三通阀将产生的汞蒸气吸收于高锰酸钾溶液(50g/L)中，待测汞仪上的读数达到零点时进行下一次测定。并求得吸光值与汞质量关系的一元线性回归方程。
5.3.3 样品测定：分别吸取样液和试剂空白液各5.0mL，置于测汞仪的汞蒸气发生器的还原瓶中，以下按5.3.2自“分别加入1.0mL还原剂氯化亚锡”起进行。将所测得其吸收值，代入标准系列的一元线性回归方程中求得样液中汞含量。
6 计算
式中：X1——样品中汞含量，μg/kg(μg/L)；
m1——测定样品消化液中汞质量，ng；
m2——试剂空白液中汞质量，ng；
V1——样品消化液总体积，mL；
V2——测定用样品消化液体积，mL；
m3——样品质量或体积，g或mL。
结果的表述：报告算术平均值的二位有效数字。
7 允许差
相对相差≤20%。
(二) 其他消化法
8 试剂
除特别注明外，所用试剂均为分析纯试剂，水均为去离子水。
8.1 硝酸。
8.2 硫酸。
8.3 氯化亚锡溶液(300g/L)：称取30g氯化亚锡(SnCl2·2H2O)，加少量水，并加2mL硫酸使溶解后，加水稀释至100mL，放置冰箱保存。
8.4 无水氯化钙：干燥用。
8.5 混合酸(1+1+8)：量取10mL硫酸，再加入10mL硝酸，慢慢倒入50mL水中，冷后加水稀释至100mL。
8.7 高锰酸钾溶液(50g/L)：配好后煮沸10min，静置过夜，过滤，贮于棕色瓶中。
8.8 盐酸羟胺溶液(200g/L)。
8.9 汞标准贮备溶液：准确称取0.1354g于干燥器干燥过的HgCl2，加混合酸(1＋1＋8)溶解后移入100mL容量瓶中，并稀释至刻度，混匀，此溶液每毫升相当于1.0mg汞。
8.10 汞
标准使用液：吸取1.0mL汞标准贮备溶液，置于100mL容量瓶中，加混合酸(1＋1＋8)稀释至刻度，此溶液每毫升相当于10.0μg汞。再吸取此液1.0mL，置于100mL容量瓶中，加混合酸(1＋1＋8)稀释至刻度，此溶液每毫升相当于0.10μg汞，临用时现配。
9 仪器
9.1 消化装置。
9.2 测汞仪。附气体干燥和抽气装置。
9.3 汞蒸气发生器。(见下图)
（图略）
10 分析步骤
10.1 样品消化
10.1.1 回流消化法
10.1.1.1 粮食或水分少的食品：称取10.00g样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒，加45mL硝酸、10mL硫酸，转动锥形瓶防止局部炭化。装上冷凝管后，小火加热，待开始发泡即停止加热，发泡停止后，加热回流2h。如加热过程中溶液变棕色，再加5mL硝酸，继续回流2h，放冷后从冷凝管上端小心加20mL水，继续加热回流10min，放冷，用适量水冲洗冷凝管，洗液并入消化液中，将消化液经玻璃棉过滤于100mL容量瓶内，用少量水洗锥形瓶、滤器，洗液并入容量瓶内，加水至刻度，混匀。按同一方法做试剂空白试验。
10.1.1.2 植物油及动物油脂：称取5.00g样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒，加入7mL硫酸，小心混匀至溶液颜色变为棕色，然后加40mL硝酸，装上冷凝管后，以下按10.1.1.1自“小火加热”起依法操作。
10.1.1.3 薯类、豆制品：称取20.00g捣碎混匀的样品(薯类须预先洗净晾干)，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及30mL硝酸、5mL硫酸，转动锥形瓶防止局部炭化。装上冷凝管后，以下按10.1.1.1自“小火加热”起依法操作。
10.1.1.4 肉、蛋类：称取10.00g捣碎混匀的样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及30mL硝酸、5mL硫酸、转动锥形瓶防止局部炭化。装上冷凝管后，以下按10.1.1.1自“小火加热”起依法操作。
10.1.1.5 牛乳及乳制品：称取20.00g牛乳或酸牛乳，或相当于20.00g牛乳的乳制品(2.4g全脂乳粉、8g甜炼乳，5g淡炼乳)，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及30mL硝酸，牛乳或酸牛乳加10mL硫酸，乳制品加5mL硫酸，转动锥形瓶防止局部炭化。装上冷凝管后，以下按10.1.1.1自“小火加热”起依法操作。
10.1.2 V2O5消化法
本法适用于水产品、蔬菜、水果。
10.1.2.1 取可食部分，洗净，晾干，切碎，混匀。取2.50g水产品或10.00g蔬菜、水果，置于50～100mL锥形瓶中，加50mgV2O5粉末，再加8mL硝酸，振摇，放置4h，加5mL硫酸，混匀，然后移至140℃砂浴上加热，开始作用较猛烈，以后渐渐缓慢，待瓶口基本上无棕色气体逸出时，用少量水冲洗瓶口，再加热5min，放冷，加5mL
高锰酸钾溶液(50g/L)，放置4h(或过夜)，滴加盐酸羟胺溶液(200g/L)使紫色褪去，振摇，放置数分钟，移入容量瓶中，并稀释至刻度。蔬菜、水果为25mL，水产品为100mL。
按同一方法进行试剂空白试验。
10.2 测定
10.2.1 用回流消化法制备的样品消化液
10.2.1.1 吸取10.0mL样品消化液，置于汞蒸气发生器内，连接抽气装置，沿壁迅速加入3mL氯化亚锡溶液(300g/L)，立即通过流速为1.0L/min的氮气或经活性炭处理的空气，使汞蒸气经过氯化钙干燥管进入测汞仪中，读取测汞仪上zui大读数，同时做试剂空白试验。
10.2.1.2 吸取0，0.10，0.20，0.30，0.40，0.50mL汞标准使用液(相当0，0.01，0.02，0.03，0.04，0.05μg汞)，置于试管中，各加10mL混合酸(1＋1＋8)，以下按10.2.1.1自“置于汞蒸气发生器内”起依法操作，绘制标准曲线。
10.2.2 用V2O5消化法制备的样品消化液
10.2.2.1 吸取10.0mL样品消化液，以下按10.2.1.1的方法操作。
10.2.2.2 吸取0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL汞标准使用液(相当0，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5μg汞)，置于6个50mL容量瓶中，各加1mL硫酸(1＋1)、1mL高锰酸钾溶液(50g/L)，加20mL水，混匀，滴加盐酸羟胺溶液(200g/L)使紫色褪去，加水至刻度混匀，分别吸取10.0mL(相当0，0.02，0.04，0.06，0.08，0.10μg汞)，以下按10.2.1.1自“置于汞蒸气发生器内”起依法操作。绘制标准曲线。
11 计算
式中：X2——样品中汞的含量，mg/kg；
m4——测定用样品消化液中汞的质量，μg；
m5——试剂空白液中汞的质量，μg；
m6——样品质量，g；
V3——样品消化液总体积，mL；
V4——测定用样品消化液体积，mL。
结果的表述：报告算术平均值的二位有效数字。
12 允许差
相对相差≤15%。
第二篇 二硫腙比色法(第二法)
13 原理
样品经消化后，汞离子在酸性溶液中可与二硫腙生成橙红络合物，溶于CHCL3，与标准系列比较定量。
14 试剂
14.1 硝酸。
14.2 硫酸。
14.3 氨水。
14.4 CHCL3：不应含有氧化物。
14.5 硫酸(1＋35)：量取5mL硫酸，缓缓倒入150mL水中，冷后加水至180mL。
14.6 硫酸(1＋19)：量取5mL硫酸，缓缓倒入水中，冷后加水至100mL。
14.7 盐酸羟胺溶液(200g/L)：吹清洁空气，除去溶液中含有的微量汞。
14.8 溴麝香草酚蓝—乙醇指示液(1g/L)。
14.9 二硫腙－CHCL3溶液(0.5g/L)，保存冰箱中，必要时用下述方法纯化。
称取0.5g研细的二硫腙，溶于50mLCHCL3中，如不全溶，可用滤纸过滤于250mL分液漏斗中，用氨水(1＋
99)提取三次，每次100mL，将提取液用棉花过滤至500mL分液漏斗中，用盐酸(1＋1)调至酸性，将沉淀出的二硫腙用CHCL3提取2～3次，每次20mL，合并CHCL3层，用等量水洗涤二次，弃去洗涤液，在50℃水浴上蒸去CHCL3。精制的二硫腙置硫酸干燥器中，干燥备用，或将沉淀出的二硫腙用200、200、100mLCHCL3提取三次，合并CHCL3层为二硫腙溶液。
14.10 二硫腙使用液：吸取1.0mL二硫腙溶液，加CHCL3至10mL，混匀。用1cm比色杯，以CHCL3调节零点，于波长510nm处测吸光度(A)，用式(3)算出配制100mL二硫腙使用液(70%透光率)所需二硫腙溶液的毫升数(V)。
14.11 汞标准溶液：准确称取0.1354g经干燥器干燥过的HgCl2，加硫酸(1＋35)使其溶解后，移入100mL容量瓶中，并稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1.0mg汞。
14.12 汞标准使用液：吸取1.0mL汞标准溶液，置于100mL容量瓶中，加硫酸(1＋35)稀释至刻度，此溶液每毫升相当于10.0μg汞。再吸取此液5.0mL于50mL容量瓶中，加硫酸(1＋35)稀释至刻度，此溶液每毫升相当于1.0μg汞。
15 仪器
15.1 消化装置。
15.2 可见分光光度计。
16 分析步骤
16.1 样品消化
16.1.1 粮食或水分少的食品：称取20.00g样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及80mL硝酸、15mL硫酸，转动锥形瓶，防止局部炭化。装上冷凝管后，小火加热，待开始发泡即停止加热，发泡停止后加热回流2h。如加热过程中溶液变棕色，再加5mL硝酸，继续回流2h，放冷，用适量水洗涤冷凝管，洗液并入消化液中，取下锥形瓶，加水至总体积为150mL。按同一方法做试剂空白试验。
16.1.2 植物油及动物油脂：称取10.00g样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及15mL硫酸，小心混匀至溶液变棕色，然后加入45mL硝酸，装上冷凝管后，以下按16.1.1自“小火加热”起依法操作。
16.1.3 蔬菜、水果、薯类、豆制品：称取50.00g捣碎、混匀的样品(豆制品直接取样，其他样品取可食部分洗净、晾干)，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及45mL硝酸、15mL硫酸，转动锥形瓶，防止局部炭化。装上冷凝管后，以下按16.1.1自“小火加热”起依法操作。
16.1.4 肉、蛋、水产品：称取20.00g捣碎混匀样品，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及45mL硝酸、15mL硫酸，装上冷凝管后，以下按16.1.1自“小火加热”起依法操作。
16.1.5 牛乳及乳制品：称取50.00g牛乳、酸牛乳，或相当于50.00g牛乳的乳制品(6g全脂乳粉，20g甜炼乳，12.5g淡炼乳)，置于消化装置锥形瓶中，加玻璃珠数粒及45mL硝酸，牛乳、酸牛乳加15mL
硫酸，乳制品加10mL硫酸，装上冷凝管，以下按16.1.1自“小火加热”起依法操作。
17 测定
17.1 取16.1.1～16.1.5消化液(全量)，加20mL水，在电炉上煮沸10min，除去二氧化氮等，放冷。
17.2 于样品消化液及试剂空白液中各加高锰酸钾溶液(50g/L)至溶液呈紫色，然后再加盐酸羟胺溶液(200g/L)使紫色褪去，加2滴麝香草酚蓝指示液，用氨水调节pH，使橙红色变为橙黄色(PH1～2)。定量转移至125mL分液漏斗中。
17.3 吸取0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0μL汞标准使用液(相当于0，0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0μg汞)，分别置于125mL分液漏斗中，加10mL硫酸(1＋19)，再加水至40mL，混匀。再各加1mL盐酸羟胺溶液(200g/L)，放置20min，并时时振摇。
17.4 于样品消化液、试剂空白液及标准液振摇放冷后的分液漏斗中加5.0mL二硫踪使用液，剧烈振摇2min，静置分层后，经脱脂棉将CHCL3层滤入1cm比色杯中，以CHCL3调节零点，在波长490nm处测吸光度，标准管吸光度减去零管吸光度，绘制标准曲线。
18 计算
式中：X3——样品中汞的含量，mg/kg；
m7——样品消化液中汞的质量，μg；
m8——试剂空白液中汞的质量，μg；
m9——样品质量，g。
结果的表述：报告算术平均值的二位有效数字。
19 允许差
相对相差≤10%。
附加说明：
本标准由卫生部卫生监督司提出。
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